[發明專利]用于肌紅蛋白檢測的組合物及應用和磁微球電化學發光免疫檢測試劑盒與檢測方法

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• 申請號: 202110406196.4
• 申請日: 2021-04-15
• 公開（公告）號: CN113092789A
• 公開（公告）日: 2021-07-09
• 發明（設計）人: 秦軍;謝元東;謝良思;賀琪琪;周璟
• 申請（專利權）人: 江蘇優尼泰克生物科技有限公司;北京聯眾泰克科技有限公司
• 主分類號: G01N33/72
• 分類號: G01N33/72;G01N33/577;G01N33/543;G01N33/532;G01N21/76
• 代理公司: 北京思創大成知識產權代理有限公司 11614
• 代理人: 高爽

本發明涉及電化學檢測領域，特別涉及用于肌紅蛋白(Myoglobin)檢測的組合物及應用和磁微球電化學發光免疫檢測試劑盒與檢測方法。本發明采用方法為電化學發光法，采用吡啶釕作為化學發光標記物具有明顯優勢，主要表現在：靈敏度更好，穩定性更好，釕是金屬離子，分子量小，不影響抗體的空間位阻。生產過程短，重復性好，檢測范圍寬。電化學發光反應可控，降低信號采集難度。

技術領域

本發明涉及電化學檢測領域，特別涉及用于肌紅蛋白(Myoglobin)檢測的組合物，該組合物的應用，包含該組合物的磁微球電化學發光免疫檢測試劑盒，以及基于該組合物或試劑盒的磁微球電化學發光免疫檢測方法。

背景技術

肌紅蛋白是在心肌和骨骼肌內發現的細胞內結合氧血紅素蛋白。在組織受到損傷后，肌紅蛋白快速釋放到循環系統內。在肌肉損傷情況下(如急性和慢性骨骼肌疾病、腎衰竭、心肌炎、心內直視手術和劇烈運動后)，可發現肌紅蛋白水平上升。

肌紅蛋白早在細胞損傷后2-4小時就釋放到循環系統內，在9到12小時之間達到高峰濃度，在24到36小時內恢復到正常水平。在沒有骨骼肌損傷情況下，肌紅蛋白用作心肌梗塞病癥的早期標志，用來排除非心肌梗塞病人。

肌紅蛋白的陰性預測結果是99％，這樣提高了急癥部門的“排除”能力，有助于減少非急性心肌梗塞典型癥狀病人錯誤進入冠狀動脈護理單元的數量。當結合其他心臟病標志(如CK-MB或心肌肌鈣蛋白I)一起應用時，肌紅蛋白具有卓越的診斷價值，可用于及早評估潛在的急性心肌梗塞病人。

到目前為止，用于檢測人血清中Myoglobin的方法主要有：酶聯免疫法(ELISA)和酶促磁微?；瘜W發光。本發明采用方法為電化學發光法，采用吡啶釕作為化學發光標記物具有明顯優勢，主要表現在：靈敏度更好，穩定性更好，釕是金屬離子，分子量小，不影響抗體的空間位阻。生產過程短，檢測范圍寬，重復性好。電化學發光反應可控，降低信號采集難度。

發明內容

本發明提供了一種用于肌紅蛋白(Myoglobin)檢測的組合物及應用和磁微球電化學發光免疫檢測試劑盒與檢測方法，具有生產效率高、檢測時間短、適用于全自動檢測，具有更高的靈敏度、線性范圍寬等優點。

為了實現上述發明目的，本發明提供以下技術方案：

本發明提供了用于肌紅蛋白(Myoglobin)檢測的組合物，包括Myoglobin試劑Ra、Myoglobin試劑Rb、鏈霉親和素超順磁微球；

所述Myoglobin試劑Ra包括含生物素標記的抗Myoglobin單克隆抗體；

所述Myoglobin試劑Rb包括含三聯吡啶釕標記的抗Myoglobin單克隆抗體；

所述鏈霉親和素超順磁微球包括表面包裹帶有鏈霉親和素的超順磁微球。

在本發明的一些具體實施方案中，所述超順磁微球的粒徑在1.5～5.0μm。

在本發明的一些具體實施方案中，所述Myoglobin試劑Ra中，每個抗體分子表面的生物素分子標記量為2～5個；所述Myoglobin試劑Rb中，每個抗體分子表面的釕分子標記量為2～10個。

在本發明的一些具體實施方案中，所述Myoglobin試劑Ra的制備方法為：在緩沖液存在的條件下，取抗Myoglobin單克隆抗體與生物素混合，制得所述Myoglobin試劑Ra；所述緩沖液包括pH＝7.4～7.8、20mM～200mM的磷酸鹽緩沖液或pH＝7.4～7.8、20mM～200mM的三羥甲基氨基甲烷緩沖液。