[發(fā)明專利]一種檢測ABO血型抗原的方法、系統(tǒng)及其應(yīng)用

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• 申請日: 2021-04-14
• 公開（公告）號: CN113092792A
• 公開（公告）日: 2021-07-09
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 高明;陳玉平;陳芳芳;王布強(qiáng);徐丹;門泉祿;徐孟靜
• 申請（專利權(quán)）人: 江蘇力博醫(yī)藥生物技術(shù)股份有限公司
• 主分類號: G01N33/80
• 分類號: G01N33/80;G01N33/68;G01N33/543
• 代理公司: 北京三聚陽光知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11250
• 代理人: 廖慧敏

本發(fā)明涉及一種檢測ABO血型抗原的方法、系統(tǒng)及其應(yīng)用，屬于生物檢測技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明提供了一種基于固相吸附法檢測ABO血型抗原的正定型方法，此方法為將待分型紅細(xì)胞分別添加至包被有抗A抗體的容器和包被有抗B抗體的容器中進(jìn)行離心后，觀察待分型紅細(xì)胞在包被有抗A抗體的容器和包被有抗B抗體的容器底部的吸附情況，根據(jù)吸附情況判斷待分型紅細(xì)胞的ABO血型抗原；此方法避免了人工操作，易于自動化操作且穩(wěn)定性高，此方法包被抗體用量少、樣本紅細(xì)胞經(jīng)稀釋后也是微量，反應(yīng)結(jié)果清晰宜讀，靈敏度高且特異性強(qiáng)，并且，此方法擺脫對價格較高的凝膠的依賴，兩個微孔和微量抗體與樣本紅細(xì)胞就可以鑒定一個樣本紅細(xì)胞的血型抗原，成本低。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種檢測ABO血型抗原的方法、系統(tǒng)及其應(yīng)用，屬于生物檢測領(lǐng)域。

背景技術(shù)

ABO血型可以分為A型、B型、O型和AB型，是經(jīng)典的人類遺傳標(biāo)記，在輸血、親子鑒定、人類學(xué)研究、法醫(yī)物證檢驗等領(lǐng)域均占據(jù)重要地位，其中，臨床輸血中ABO血型分型的意義最為重要，屬于臨床輸血前檢查的必查項目。

ABO血型分型可分正定型和反定型。正定型是用抗A和抗B抗體去鑒定被檢者紅細(xì)胞上有沒有相應(yīng)的抗原，反定型是用A型紅細(xì)胞和B型紅細(xì)胞去鑒定被檢者血清(血漿)中有無相應(yīng)的抗體。根據(jù)正反定型結(jié)果，進(jìn)而檢測出被檢者ABO系統(tǒng)的具體血型。

目前，通用的ABO血型分型方法有玻片法(紙片法)、試管法、微板凝集法、微柱凝膠法等方法(玻片法、試管法、微板凝集法、微柱凝膠法均記載于《全國臨床檢驗操作規(guī)程》中)。但是，這些方法均存在缺陷，例如：

玻片法和試管法需要人工進(jìn)行混勻的步驟，費時費力，還容易產(chǎn)生人為誤差；

微板凝集法抗體和紅細(xì)胞的加樣量和抗體批間差異會影響結(jié)果的穩(wěn)定性；

微柱凝膠法在運輸過程中試劑凝膠容易變形和產(chǎn)生氣泡，影響檢測結(jié)果。

發(fā)明內(nèi)容

為解決上述問題，本發(fā)明提供了一種檢測ABO血型抗原的方法，所述方法包含分型步驟；所述分型步驟為：將待分型紅細(xì)胞分別添加至包被有抗A抗體的容器和包被有抗B抗體的容器中進(jìn)行離心，離心結(jié)束后，觀察待分型紅細(xì)胞在包被有抗A抗體的容器和包被有抗B抗體的容器底部是否被抗體吸附；

若待分型紅細(xì)胞在包被有抗A抗體的容器和包被有抗B抗體的容器底部均沒有被吸附，則待分型紅細(xì)胞的ABO血型抗原為O型；

若待分型紅細(xì)胞僅在包被有抗B抗體的容器底部被吸附，則待分型紅細(xì)胞的ABO血型抗原為B型；

若待分型紅細(xì)胞僅在包被有抗A抗體的容器底部被吸附，則待分型紅細(xì)胞的ABO血型抗原為A型；

若待分型紅細(xì)胞在包被有抗A抗體的容器和包被有抗B抗體的容器底部均被吸附，則待分型紅細(xì)胞的ABO血型抗原為AB型。

在本發(fā)明的一種實施方式中，所述離心的轉(zhuǎn)速為90～360g、時間為1～30min。

在本發(fā)明的一種實施方式中，所述離心的轉(zhuǎn)速為190～360g、時間為1～3min。

在本發(fā)明的一種實施方式中，所述分型步驟前，還包含稀釋步驟；所述稀釋步驟為：將待分型紅細(xì)胞稀釋至體積濃度為0.3～1％。

在本發(fā)明的一種實施方式中，所述稀釋步驟為：用Liss(低離子強(qiáng)度溶液)或生理鹽水將待分型紅細(xì)胞稀釋至體積濃度為0.3～1％。

在本發(fā)明的一種實施方式中，所述稀釋步驟為：用生理鹽水將待分型紅細(xì)胞洗滌3～5次后，用Liss或生理鹽水將待分型紅細(xì)胞稀釋至體積濃度為0.3～1％。

在本發(fā)明的一種實施方式中，所述待分型紅細(xì)胞在包被有抗A抗體的容器或包被有抗B抗體的容器中的添加量為10～100μL。