[發明專利]一種偽狂犬病病毒的檢測方法在審
| 申請號： | 202110401217.3 | 申請日： | 2021-04-14 |
| 公開（公告）號： | CN112899407A | 公開（公告）日： | 2021-06-04 |
| 發明（設計）人： | 謝芝勛;張民秀;張艷芳;謝麗基;謝志勤;李孟;鄧顯文;羅思思;范晴;曾婷婷;黃嬌玲;王盛;李丹;劉加波 | 申請（專利權）人： | 廣西壯族自治區獸醫研究所 |
| 主分類號： | C12Q1/70 | 分類號： | C12Q1/70;C12Q1/686;C12R1/93 |
| 代理公司： | 北京國謙專利代理事務所(普通合伙) 11752 | 代理人： | 肖應國 |
| 地址： | 530001 廣西壯族自*** | 國省代碼： | 廣西;45 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 狂犬病 病毒 檢測 方法 | ||
1.一種偽狂犬病病毒的檢測方法,所述檢測方法包括如下步驟：(1)DNA模板擴增；(2)納米PCR擴增；(3)PCR產物檢測，其特征在于，所述納米PCR擴增中的引物對序列選自序列表中SEQ ID No.1-2、SEQ ID No.3-4或SEQ ID No.5-6。
2.如權利要求1所述的偽狂犬病病毒的檢測方法，其特征在于，所述納米PCR反應體系為每20ul反應體系中，1μL DNA模板，2×Nano-QPCR buffer 10μL，上下游引物終濃度0.1-1μmol/L，5U/uL taq enzyme Mix0.32μL，加ddH2O補足20μL。
3.如權利要求2所述的偽狂犬病病毒的檢測方法，其特征在于，所述納米PCR反應程序為95℃反應3min；94℃反應5s，退火溫度50-57℃反應5s，72℃反應30s，進行20個循環；72℃反應5min，12℃結束反應。
4.如權利要求3所述的偽狂犬病病毒的檢測方法，其特征在于，所述引物對序列為序列表中SEQ ID No.1-2所示核苷酸序列。
5.如權利要求4所述的偽狂犬病病毒的檢測方法，其特征在于，所述上下游引物終濃度為0.1μmol/L。
6.如權利要求4或5所述的偽狂犬病病毒的檢測方法，其特征在于，所述退火溫度為50℃。
7.如權利要求3所述的偽狂犬病病毒的檢測方法，其特征在于，所述引物對序列為序列表中SEQ ID No.3-4所示核苷酸序列。
8.如權利要求7所述的偽狂犬病病毒的檢測方法，其特征在于，所述上下游引物終濃度為1μmol/L。
9.如權利要求7或8所述的偽狂犬病病毒的檢測方法，其特征在于，所述退火溫度為50℃。
10.如權利要求1所述的偽狂犬病病毒的檢測方法，其特征在于，所述PCR產物檢測采用1.2％瓊脂糖凝膠電泳驗證擴增結果。
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