[發明專利]一種分離純化生物表面活性劑鼠李糖脂的方法

有效

• 申請號: 202110398316.0
• 申請日: 2021-04-14
• 公開（公告）號: CN113150043B
• 公開（公告）日: 2022-10-18
• 發明（設計）人: 羅志剛;楊歡;齊亮
• 申請（專利權）人: 華南理工大學;廣州現代產業技術研究院
• 主分類號: C07H1/06
• 分類號: C07H1/06;C07H15/04;C09K23/56
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 殷妹

1.一種分離純化生物表面活性劑鼠李糖脂的方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)將鼠李糖脂發酵液過濾，收集濾液，離心，取上清液；

(2)用酸調節步驟(1)上清液的pH，使鼠李糖脂析出，靜置，離心，收集沉淀；

(3)用碳酸氫鈉溶液重懸步驟(2)的沉淀，自然沉降，收集上清液；

(4)用酸調節步驟(3)上清液的pH，使鼠李糖脂析出，靜置，離心，收集沉淀；

(5)將步驟(4)的沉淀加入有機溶劑中進行萃取，收集有機相，將有機相與磷酸鹽緩沖溶液混勻，靜置分層，使有機相中的鼠李糖脂反萃取到水相中，下層水相即為純化后的鼠李糖脂溶液；

步驟(5)所述磷酸鹽緩沖溶液的pH為7～8；磷酸鹽緩沖溶液的體積為有機相體積的1～3倍；所述磷酸鹽緩沖溶液的濃度為0.1～0.2mol/L；

步驟(5)所述有機溶劑為氯仿和乙酸乙酯中的至少一種；步驟(5)所述有機溶劑與步驟(4)沉淀的質量比為10：1～20：1。

2.根據權利要求1所述一種分離純化生物表面活性劑鼠李糖脂的方法，其特征在于，步驟(3)所述碳酸氫鈉溶液的濃度為0.05～0.1mol/L，溶劑為水。

3.根據權利要求1所述一種分離純化生物表面活性劑鼠李糖脂的方法，其特征在于，步驟(3)所述碳酸氫鈉溶液與步驟(2)沉淀的質量比為10：1～20：1。

4.根據權利要求1所述一種分離純化生物表面活性劑鼠李糖脂的方法，其特征在于，步驟(2)和(4)所述酸均為磷酸、鹽酸和硫酸中的至少一種，所述酸以溶液的形式加入，酸溶液的濃度為4～6mol/L，將上清液的pH調至2～3。

5.根據權利要求1所述一種分離純化生物表面活性劑鼠李糖脂的方法，其特征在于，步驟(3)所述重懸、自然沉降和收集上清液的操作重復1～3次，重復1次的操作即是將所得的上清液用碳酸氫鈉溶液重懸，自然沉降后收集上清液。

6.根據權利要求1所述一種分離純化生物表面活性劑鼠李糖脂的方法，其特征在于，步驟(2)和(4)所述靜置均為在4℃環境中靜置8～12h。

7.根據權利要求1所述一種分離純化生物表面活性劑鼠李糖脂的方法，其特征在于，步驟(1)所述離心指收集到的鼠李糖脂發酵液在8000～10000rpm下離心10～15min；步驟(2)和(4)所述離心均指在4000～10000rpm下離心8～10min。

8.根據權利要求1所述一種分離純化生物表面活性劑鼠李糖脂的方法，其特征在于，步驟(5)所述有機溶劑萃取1～5次。