[發明專利]一種酶分布位置可控的pH響應性載酶淀粉顆粒及其制備方法

有效

• 申請號: 202110398295.2
• 申請日: 2021-04-14
• 公開（公告）號: CN113151244B
• 公開（公告）日: 2023-02-17
• 發明（設計）人: 羅志剛;周玉靜;雷介青;齊亮
• 申請（專利權）人: 華南理工大學;廣州現代產業技術研究院
• 主分類號: C12N11/10
• 分類號: C12N11/10
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 殷妹

1.一種酶分布位置可控的pH響應性載酶淀粉顆粒的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）將淀粉糊化后，與交聯劑和具有pH響應性化合物進行自由基接枝反應，再進行乙醇造粒得到pH響應性淀粉納米顆粒；

（2）將pH響應性淀粉納米顆粒與脂肪酶溶液混合反應，離心洗滌，得到酶分布位置可控的pH響應性載酶淀粉顆粒；

步驟（2）所述脂肪酶溶液的濃度為2～6mg/mL；

步驟（1）所述交聯劑為N,N - 亞甲基雙丙烯酰胺和六亞甲基雙丙烯酰胺中的至少一種；所述具有pH響應性化合物為甲基丙烯酸二甲氨基乙酯、乙二醇甲基丙烯酸酯和甲基丙烯酸二乙氨基乙酯中的至少一種；

步驟（2）所述脂肪酶溶液的pH為6～8，溶劑為磷酸鹽緩沖液；步驟（2）所述pH響應性淀粉納米顆粒與脂肪酶的質量比為1g：40～120mg；

步驟（2）所述混合反應的溫度為20～40℃，時間為1～3h；

步驟（1）所述淀粉、交聯劑和具有pH響應性化合物的比例為（3～5）g：（0.1～0.3）g：（2～6）ml；步驟（1）所述自由基接枝反應的pH為8～10，溫度為60～80℃，時間為1～3h；

步驟（1）所述自由基接枝反應在催化劑作用下進行，所述催化劑為過硫酸銨和亞硫酸氫鈉，所述淀粉、過硫酸銨和亞硫酸氫鈉的質量比為（3～5）g：（30～90）mg：（20～60）mg；

步驟（1）所述乙醇造粒指將產物按照體積比1：20～40滴加到乙醇中，然后進行800～1200轉/min攪拌，得到納米顆粒混合液；所述滴加的速度為0.005～0.02mL/s；

步驟（1）所述自由基接枝反應在氮氣或惰性氣體保護下進行。

2.根據權利要求1所述一種酶分布位置可控的pH響應性載酶淀粉顆粒的制備方法，其特征在于，步驟（1）所述淀粉糊化指將淀粉與水按照30～50mg/ml的比例混合后，于95℃糊化30分鐘。

3.根據權利要求1所述一種酶分布位置可控的pH響應性載酶淀粉顆粒的制備方法，其特征在于，步驟（1）所述自由基接枝反應結束后，將產物混合液進行離心洗滌得到產物，其中離心速度為3000～5000rpm，離心時間為3～5min，洗滌次數為3～5次；步驟（2）所述離心洗滌中離心速度為3000～5000rpm，離心時間為3～5min，洗滌次數為5～15次。

4.權利要求1～3任一項所述方法制得的一種酶分布位置可控的pH響應性載酶淀粉顆粒。