[發明專利]一種特異性結合IFN-γ的抗體及其應用

有效

• 申請號: 202110398237.X
• 申請日: 2021-04-14
• 公開（公告）號: CN112794903B
• 公開（公告）日: 2021-06-25
• 發明（設計）人: 樓建榮;楊翔;謝桂華;黃慧紅
• 申請（專利權）人: 廣州市雷德生物科技有限公司
• 主分類號: C07K16/24
• 分類號: C07K16/24;G01N33/68;G01N33/577;C07K14/57;C07K1/14;A61K39/395;A61P29/00;A61P37/00
• 代理公司: 廣州市諾豐知識產權代理事務所(普通合伙) 44714
• 代理人: 許飛;黃國亮

本發明公開了涉及生物技術領域，公開了一種特異性結合IFN?γ的抗體及其應用。抗體包括至少一個包含三個CDR的重鏈可變區和至少一個包含三個CDR的輕鏈可變區，重鏈可變區的HCDR1序列為SYWIH，HCDR2序列為AIDPSDSYTMHNEKFKD，HCDR3序列為GRLDY；輕鏈可變區LCDR1序列為KSSQSLLDSDGETYLN，LCDR2序列為LVSKLDS，LCDR3序列為WQNTHSPRT。本發明的特異性結合IFN?γ抗體是針對真核表達的IFN?γ抗原篩選出的，可應用于進行所有關于人的IFN?γ的檢測，抗體的特異性較高，可以開發成為IFN?γ檢測試劑、吸附劑等。

技術領域

本發明涉及生物技術領域，具體涉及一種特異性結合IFN-γ的抗體及其應用。

背景技術

γ-干擾素是一個重要的能行使免疫調節功能的細胞因子，其在一系列炎癥反應中，可由許多的細胞分泌，包括CD4+T細胞、CD8+T細胞、巨噬細胞、B細胞、中性粒細胞等。并且在CAR-T細胞回輸治療過程，高度增殖的T細胞會引起細胞因子釋放綜合癥（CRS）,血液中的IFN-γ、TNF-α、IL-6等細胞因子會明顯升高，出現“細胞因子風暴”。對γ-干擾素的檢測在生物醫學的科研中，體外診斷中都具有重大意義。IFN-γ細胞因子作為免疫學檢測指標，其免疫學檢測是在特異性抗IFN-γ抗體的基礎上對樣本中的IFN-γ定性定量分析。

結核病作為一種主要經呼吸道傳播引起的全身慢性傳染病，作為全球十大死因之一，其已然成為了一個社會關注的公共衛生問題。IGRAs（γ-干擾素釋放試驗）作為國際最新的用于結核桿菌感染的體外免疫診斷方法，其原理主要是人體初次感染結核菌后，使Ｔ淋巴細胞轉化為記憶Ｔ淋巴細胞，當人體再次接觸結核分枝桿菌后，會迅速產生效應Ｔ淋巴細胞，釋放多種細胞因子，其中γ-干擾素是最關鍵的細胞因子，在機體外用分枝桿菌特異抗原刺激受試者外周血單個核細胞，若其中含有記憶Ｔ淋巴細胞，就會分泌大量IFN-γ細胞因子，測定分離至全血或單個核細胞的IFN-γ釋放水平，可以判斷是否有結核桿菌感染。γ-干擾素釋放試驗克服了結核菌素試驗（TST）的不足，其采用結核特異性抗原刺激記憶T淋巴細胞，使其釋放IFN-γ細胞因子，這些特異性抗原只存在于結核分枝桿菌復合群，具有高靈敏度和特異性，不僅可區分卡介苗接種（BCG）與非結核分枝桿菌（NTM）感染，還可用于肺外結核檢測。

現有技術中制備的抗IFN-γ抗體大多為使用多肽或原核表達的抗原篩選的抗體，檢測效果不佳，特異性較低。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術的至少一個不足，提供一種特異性結合IFN-γ的單克隆抗體及其應用。

本發明所采取的技術方案是：

本發明的第一個方面，提供：

一種特異性結合人IFN-γ的抗體，包括至少一個包含三個CDR的重鏈可變區和至少一個包含三個CDR的輕鏈可變區，

重鏈可變區的HCDR1序列為SYWIH，HCDR2序列為AIDPSDSYTMHNEKFKD，HCDR3序列為GRLDY；

輕鏈可變區LCDR1序列為KSSQSLLDSDGETYLN，LCDR2序列為LVSKLDS，LCDR3序列為WQNTHSPRT。

在一些實例中，所述重鏈可變區的恒定區序列包含HFR1～HFR4中的至少一條，其中：

HFR1：QVQLQQPGAELVKPGASVRMSCKASGYTFT；

HFR2：WVKQRPGQGLEWIG；

HFR3：KATLTVDASSNTAHMQLSGLTSEDSAVYYCTA；

HFR4：WGQGTTLTVSS。