[發明專利]一種β-煙酰胺單核苷酸的酶催化合成方法有效
| 申請號: | 202110397653.8 | 申請日: | 2021-04-14 |
| 公開(公告)號: | CN112795606B | 公開(公告)日: | 2021-07-27 |
| 發明(設計)人: | 于鐵妹;林立峰;凌瑞枚;秦國富;何秀秀;譚文靜;潘俊鋒;劉建 | 申請(專利權)人: | 深圳瑞德林生物技術有限公司 |
| 主分類號: | C12P19/30 | 分類號: | C12P19/30 |
| 代理公司: | 北京集佳知識產權代理有限公司 11227 | 代理人: | 劉猛 |
| 地址: | 518000 廣東省深圳市南山區粵海街道麻*** | 國省代碼: | 廣東;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 煙酰胺單 核苷酸 催化 合成 方法 | ||
1.一種β-煙酰胺單核苷酸的酶催化合成方法,其特征在于,以腺苷、煙酰胺、ATP或其鹽、多聚磷酸激酶、Mg離子或錳離子、多聚磷酸鹽以及磷酸鹽為原料,在EC編號為EC2.4.2.1的嘌呤核苷磷酸化酶和EC編號為EC 2.7.1.22 煙酰胺核糖激酶的酶催化作用下合成β-煙酰胺單核苷酸,所述磷酸鹽不包含多聚磷酸鹽;所述嘌呤核苷磷酸化酶包含氨基酸序列如SEQ ID NOs.1-7所示中的一種或兩種以上的嘌呤核苷磷酸化酶。
2.根據權利要求1所述方法,其特征在于,所述煙酰胺核糖激酶來源于
3.根據權利要求1所述方法,其特征在于,各所述酶以表達各酶的宿主細胞、各酶的酶液或各酶的固定化酶形式參與酶催化反應。
4.根據權利要求3所述方法,其特征在于,所述表達各酶的宿主細胞為含有表達各酶的載體或共表達兩種酶的載體的大腸桿菌。
5.根據權利要求3所述方法,其特征在于,所述各酶的酶液為從表達各酶的宿主細胞中提取的酶液。
6.根據權利要求1所述方法,其特征在于,反應過程維持反應液的pH在6.5-9.5之間。
7.根據權利要求1所述方法,其特征在于,反應溫度在25-50℃。
8.根據權利要求1所述方法,其特征在于,還包括β-煙酰胺單核苷酸的純化步驟:
經過濾、層析分析,濃縮結晶干燥后獲得β-煙酰胺單核苷酸的純品。
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