[發明專利]一組與小麥抗寒性顯著關聯的SNP位點及其在遺傳育種中的應用有效
| 申請號： | 202110397635.X | 申請日： | 2021-04-14 |
| 公開（公告）號： | CN113046465B | 公開（公告）日： | 2023-06-27 |
| 發明（設計）人： | 劉樹兵;燕強;龐昀龍;劉春霞;王丹峰;路悅 | 申請（專利權）人： | 山東農業大學 |
| 主分類號： | C12Q1/6895 | 分類號： | C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京中知慧專利代理事務所(普通合伙) 11969 | 代理人： | 梁軍 |
| 地址： | 271018 *** | 國省代碼： | 山東;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一組 小麥 抗寒性 顯著 關聯 snp 及其 遺傳 育種 中的 應用 | ||
1.檢測與小麥抗寒性相關SNP位點的KASP引物組合在小麥抗寒性鑒定中的應用，其特征在于：所述的SNP位點由2個SNP位點組成，編號分別為SNP9，SNP10，它們的信息如下：
表中物理位置以中國春基因組IWGSC?reference?genome?v1.1，2018為參考序列；
表中所列序列見序列表SEQ?ID?NO.17～SEQ?ID?NO.20；
2個SNP位點基因型與陽光5號相同的小麥表現為抗寒，與中麥875相同的小麥表現為凍害，雜合個體的抗寒性介于二者之間。
2.檢測與小麥抗寒性相關SNP位點的KASP引物組合在制備小麥抗寒性鑒定試劑盒中的應用，其特征在于：所述的SNP位點由2個SNP位點組成，編號分別為SNP9，SNP10，它們的信息如下：
表中物理位置以中國春基因組IWGSC?reference?genome?v1.1?，2018為參考序列；
表中所列序列見序列表SEQ?ID?NO.17～SEQ?ID?NO.20；
2個SNP位點基因型與陽光5號相同的小麥表現為抗寒，與中麥875相同的小麥表現為凍害，雜合個體的抗寒性介于二者之間。
3.檢測與小麥抗寒性相關SNP位點的KASP引物組合在制備小麥抗寒性鑒定基因芯片中的應用，其特征在于：所述的SNP位點由2個SNP位點組成，編號分別為SNP9，SNP10，它們的信息如下：
表中物理位置以中國春基因組IWGSC?reference?genome?v1.1?，2018為參考序列；
表中所列序列見序列表SEQ?ID?NO.17～SEQ?ID?NO.20；
2個SNP位點基因型與陽光5號相同的小麥表現為抗寒，與中麥875相同的小麥表現為凍害，雜合個體的抗寒性介于二者之間。
4.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述應用包括以下步驟：
（1）以小麥DNA為PCR擴增模板，以設計合成的KASP引物，分別進行PCR擴增；PCR反應體系具體包括：20-50ng/μL的DNA?3μL，2×KASP?Master?mix?3μL,上下游引物混合液0.0825μL；置于384孔PCR儀擴增；
（2）PCR擴增程序為:94℃預變性15min；94℃變性20s，65-57℃復性60s，每循環降低0.8℃，10個循環；94℃變性20s，57℃復性60s，30個循環；10℃保存；
（3）PCR結束后，置于Omega?SNP分型儀檢測PCR分型結果；
（4）分析鑒定，根據分型結果分析基因型。
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