[發明專利]一株木賊鐮刀菌L1293及其應用

有效

• 申請號: 202110395810.1
• 申請日: 2021-04-13
• 公開（公告）號: CN113265336B
• 公開（公告）日: 2022-04-29
• 發明（設計）人: 劉宏偉;韓俊杰
• 申請（專利權）人: 中國科學院微生物研究所
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12P17/08;C12R1/77
• 代理公司: 北京律和信知識產權代理事務所(普通合伙) 11446
• 代理人: 項榮;何春暉

本發明屬于微生物發酵制備玉米赤霉烯酮技術領域。本發明公開了一株木賊鐮刀菌(Fusarium equiseti)L1293，其保藏編號為CGMCC NO.19032該菌株已于2019年12月10日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏號為CGMCC No.19032，保藏單位地址為北京市朝陽區北辰西路1號院3號。本發明的菌株具有高效玉米赤霉烯酮(ZEN)合成能力。

技術領域

本發明屬于微生物發酵制備玉米赤霉烯酮技術領域。

背景技術

真菌毒素(mycotoxin)是產毒真菌分泌產生的，能引起人畜各種損害的次級代謝產物。玉米赤霉烯酮(ZEN)，又稱F-2毒素，具有生殖、免疫、肝臟、細胞等毒性以及致癌性，嚴重威脅動物及人類的健康安全。隨人們對食品的健康和安全高度重視，對真菌毒素的檢測越來越嚴格，檢測范圍越來越廣泛。目前國內檢測所需玉米赤霉烯酮(ZEN)標準物質絕大多數依賴于進口，價格昂貴。為了保證檢測分析所需ZEN標準物質的供應，減少進口依賴。篩選獲得ZEN高產菌株，對其進行發酵培養，從中分離純化高純度的ZEN，將為ZEN的分析檢測提供來源，也為深入研究ZEN及其開發利用提供物質基礎。

發明內容

本發明的目的是提供一株木賊鐮刀菌(Fusarium equiseti)L1293，其保藏編號為CGMCC NO.19032，該菌株已于2019年12月10日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏號為CGMCC No.19032，保藏單位地址為北京市朝陽區北辰西路1號院3號。

另一方面本發明還提供了木賊鐮刀菌(F.equiseti)L1293在制備制備玉米赤霉烯酮中的應用。

本發明提供的保藏編號為CGMCC NO.19032的木賊鐮刀菌(F.equiseti)L1293具有高效玉米赤霉烯酮合成能力，其發酵提取物中含有高達43.8％玉米赤霉烯酮(ZEN/發酵提取物比)。

附圖說明

圖1為菌株L1293的菌落和厚垣孢子形態圖。

圖2為菌株L1293粗提物與標準品ZEN的HPLC對照圖。

圖3為菌株L1293粗提物中ZEN的MS圖。

圖4為化合物玉米赤霉烯酮(ZEN)的氫譜。

具體實施方式

下面將結合實施例對本發明的優選實施方式進行詳細說明。需要理解的是以下實施例的給出僅是為了起到說明的目的，并不是用于對本發明的范圍進行限制。本領域的技術人員在不背離本發明的宗旨和精神的情況下，可以對本發明進行各種修改和替換。

下述實施例中所使用的實驗方法如無特殊說明，均為常規方法。下述實施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業途徑得到。

本實施例所得菌株，通過常規篩選方式從污染糧食中篩選所得，因此本實施例就該菌株的篩選獲得過程簡要介紹說明如下。

樣品來源：污染糧食(包括小麥、玉米、大米、高粱和花生)來自河南省，2019年10月采集完成后，所采集的污染糧食置于密閉的無菌塑料袋中于4℃保存，并在1周內進行菌株分離。

實施例1、菌株L1293的分離與鑒定

菌株分離自河南新鄭市污染玉米。

稱取10g玉米種子，放入75％酒精中浸泡15～20s，然后移入100mL無菌水中，振搖30min，放入25℃恒溫箱中培養4～5d，當玉米種子周圍長出菌絲體或種子表面有霉層時，將菌絲或霉層移入PDA培養基上，在25℃恒溫下進行培養。每天檢查培養基，對單菌落進行分離純化，獲得純化菌株得13株純菌株。