[發明專利]環狀RNA作為骨關節炎標志物的應用

有效

• 申請號: 202110394746.5
• 申請日: 2021-04-13
• 公開（公告）號: CN113249464B
• 公開（公告）日: 2022-09-27
• 發明（設計）人: 李興;林定坤;侯宇;陳樹東;侯永輝;羅丹;詹吉恒;欒繼耀
• 申請（專利權）人: 廣東省中醫院(廣州中醫藥大學第二附屬醫院;廣州中醫藥大學第二臨床醫學院;廣東省中醫藥科學院)
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883;C12N15/11;A61K45/00;A61P19/02
• 代理公司: 廣州嘉權專利商標事務所有限公司 44205
• 代理人: 林德強

本發明屬于生物醫學技術領域，具體涉及環狀RNA作為骨關節炎標志物的應用。所述環狀RNA為has_circ_0000423，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本發明研究發現與正常軟骨組織相比，hsa_circ_0000423在骨關節炎患者軟骨組織中呈現高表達，因此，通過檢測hsa_circ_0000423的含量，有助于判斷受試者是否存在患骨關節炎的高風險，這為臨床輔助診斷及評估骨關節炎，意義顯著。同時，本發明通過進一步研究軟骨細胞生物學功能發現了hsa_circ_0000423在OA發生發展的診斷及治療價值，從而為該病的診治提供關鍵的理論依據及干預靶點，具有重要的潛在價值和良好的應用前景。

技術領域

本發明屬于生物醫學技術領域，具體涉及環狀RNA has_circ_0000423作為骨關節炎標志物的應用。

背景技術

骨關節炎(osteoarthritis，OA)是在機械性和生物性因素作用下，關節軟骨細胞、細胞外基質和軟骨下骨的正常合成與降解失衡，導致關節軟骨退變、纖維化、軟骨下骨硬化、炎性變和骨贅形成，出現關節疼痛、活動受限、畸形等為臨床表現的一種疾病。骨關節炎是骨科臨床困擾已久且又亟待解決的難題，多發于老年人，常累及全身骨關節中的脊柱、髖關節和膝關節等負重較大的關節，導致受累關節僵硬、變形，從而使關節功能受到嚴重影響，影響患者的生活質量。因此，研究如何抑制關節軟骨退變，預防OA發生與發展一直是骨科臨床尋求的熱點。目前主要預防及修復的措施有：間質干細胞的移植后的促軟骨分化、自體軟骨或生物材料移植等填補缺損軟骨部位，雖取得了一定療效，但仍存在再生軟骨組織和缺損邊緣軟骨退變等問題。因此，尋找一種靈敏性高，特異性強的生物標志物和一種安全有效的靶點作用方法，對骨關節炎早發現、早診斷及早干預治療至關重要。

circRNAs最早于1976年首次在類病毒中發現，并在隨后的數十年中，在真核細胞和病毒中也同樣檢測到circRNAs的存在。起初，因為其表達水平低，人們對其很少關注，并且認為它的產生是選擇性剪切失敗的產物。然而，隨著新一代測序技術的出現和生物信息學技術的不斷發展，circRNAs在真核細胞中具有調節功能已經成為了共識。Jeck等人和Memcz等人通過RNA測序和生物信息分析，同樣發現在不同物種、細胞中circRNAs存在表達。circRNA是閉合的環狀結構，沒有5’-3’極性和聚核苷酸的尾巴結構，其由特殊的末端反向互補的前體mRNA可變剪切，并首尾環化形成環狀RNA。近幾年的研究發現circRNA可能存在以下幾種功能：①作為內源mRNA競爭者，擁有miRNA海綿結合位點，能吸附miRNA，抑制其功能；②調控可變剪切或轉錄過程；調控親本基因的表達；③可直接翻譯多肽。circRNA可調控多個miRNA，因而被稱為miRNA“sponge”功能，而miRNA可調控多達上百個蛋白編碼基因，這些蛋白分子與非編碼信號構成了復雜而精確的RNA-RNA互作網絡，從而可在OA中發揮著重要的調控作用，這些功能的發現為探索OA疾病的診斷治療轉歸等方面提供了新的思路，并可將circRNAs可能作為臨床診斷生物標記物和治療靶點提供新思路。目前，與骨關節炎相關的環狀RNA仍有很多未被發現，研究尋找這些環狀RNA對骨關節炎的預防診斷和治療都具有重要的研究價值和臨床價值。

發明內容

本發明旨在解決現有技術中存在的技術問題之一。為此，本發明提供了環狀RNA，has_circ_0000423，作為骨關節炎標志物的應用。

本發明所采用的技術方案如下文所述。

本發明一方面提供一種檢測環狀RNA has_circ_0000423的試劑在制備用于骨關節炎的診斷和/或預后的診斷劑中的應用，其中，所述環狀RNA has_circ_0000423的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。

根據本發明的一些實施方式，所述試劑包括適用于如下至少一種方法的試劑：熒光染料法、數字PCR、共振光散射法、實時熒光定量PCR、測序或生物質譜法。