[發(fā)明專利]一種魚鰾膠原蛋白的提取方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110394459.4
• 申請(qǐng)日: 2021-04-13
• 公開（公告）號(hào): CN112899336A
• 公開（公告）日: 2021-06-04
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 郭紅星;周盡學(xué)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 海南三元星生物科技股份有限公司
• 主分類號(hào): C12P21/06
• 分類號(hào): C12P21/06;C07K1/14;C07K1/16;C07K14/78
• 代理公司: 北京集佳知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11227
• 代理人: 王歡

本發(fā)明涉及蛋白提取技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種膠原蛋白的提取方法。該方法通過(guò)酸?酶提取法提取魚鰾膠原蛋白，可有效縮短膠原蛋白的提取時(shí)間，以及保證膠原蛋白中與活性相關(guān)的結(jié)構(gòu)的完整性，作用條件溫和，材料無(wú)毒，無(wú)污染，采用魚鰾提取膠原蛋白，魚鰾膠原蛋白可應(yīng)用于醫(yī)學(xué)中人工軟骨組織凝膠用來(lái)修復(fù)骨組織的缺損和修復(fù)，應(yīng)用于組織細(xì)胞的培養(yǎng)，應(yīng)用于止血和傷口修復(fù)，應(yīng)用于制藥和保健食品，應(yīng)用于制作納米發(fā)電機(jī)，還具有抗疲勞功效。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及蛋白提取技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種魚鰾膠原蛋白的提取方法。

背景技術(shù)

魚鰾的在魚身上的作用是輔助魚在水中的升降，也作為穩(wěn)定使用，位于魚身體的中心，可以保持重心向下；使魚腹腔產(chǎn)生足夠的空間，保護(hù)其內(nèi)臟器官，避免水壓過(guò)大，內(nèi)臟器官受損；在肺魚和總鰭魚類中，魚鰾可以作為輔助呼吸器官；在缺氧的環(huán)境中，魚鰾可以作為輔助呼吸器官，為魚提供氧氣。目前已出現(xiàn)從魚鱗、魚皮、魚骨和內(nèi)臟等魚副產(chǎn)物中提取膠原蛋白并應(yīng)用的研究報(bào)道但魚鱗存在腥味且含有較多鈣雜質(zhì)魚皮帶有顏色且熱變性溫度較低，在一定程度上限制了其應(yīng)用，魚鰾則成為另一種富含膠原蛋白的重要替代原料，魚鰾是魚的平衡和比重調(diào)節(jié)器官，用于感壓、發(fā)聲和輔助呼吸，又名魚膠、魚泡、魚白、魚肚、壓胞，是用于烹飪的名貴佳肴，能養(yǎng)血補(bǔ)血、滋陰補(bǔ)腎、消疲御疾等，具有極高的食用和藥用價(jià)值。

目前對(duì)魚鰾的利用率較低，大多數(shù)都以廢棄物的形式丟棄，浪費(fèi)了資源，也污染了環(huán)境，不能利用魚鰾制造更好的膠原蛋白，并且不同提取方法對(duì)膠原蛋白的活性和生產(chǎn)效率影響較大。

發(fā)明內(nèi)容

有鑒于此，本發(fā)明提供了一種魚鰾膠原蛋白的提取方法。本發(fā)明提供的方法制得的魚鰾膠原蛋白能夠在最大程度上保持膠原蛋白的三股螺旋結(jié)構(gòu)，保持天然活性。

為了實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明提供以下技術(shù)方案：

本發(fā)明提供了一種魚鰾膠原蛋白的提取方法，包括如下步驟：

將魚鰾用0.1mol/L乙酸提取1h，得提取液；

向所述提取液中加入0.1％-0.2％胃蛋白酶或者胰蛋白酶酶解1～2h，滅酶，離心，收集上清液；

所述上清液經(jīng)色譜純化，獲得魚鰾膠原蛋白。

作為優(yōu)選，所述魚鰾在乙酸提取前還包括預(yù)處理的步驟，所述預(yù)處理包括脫色、脫蛋白和脫脂的處理。

具體地，所述脫色、脫蛋白處理為：用0.1m/L的氫氧化鈉浸泡24h。

所脫脂處理為：用10％丁醇浸泡12h。

作為優(yōu)選，所述預(yù)處理還包括超聲30min-60min除去魚鰾內(nèi)部雜質(zhì)的步驟。

作為優(yōu)選，所述酶解的時(shí)間為1h。

作為優(yōu)選，所述色譜純化的檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm。

本發(fā)明還提供了所述提取方法制得的魚鰾膠原蛋白。

本發(fā)明提取方法制得的魚膠蛋白中，甘氨酸含量占所述魚鰾膠原蛋白總質(zhì)量的1/3。

本發(fā)明提供了一種魚鰾膠原蛋白的提取方法，包括如下步驟：將魚鰾用0.1mol/L乙酸提取1h，得提取液；向所述提取液中加入0.1％-0.2％胃蛋白酶或者胰蛋白酶酶解1～2h，滅酶，離心，收集上清液；所述上清液經(jīng)色譜純化，獲得魚鰾膠原蛋白。本發(fā)明具有以下有益效果：

1、本發(fā)明通過(guò)酸-酶提取法提取魚鰾膠原蛋白，通過(guò)電泳圖譜分析發(fā)現(xiàn)，提取得到的膠原蛋白的酰胺條帶清晰且無(wú)雜帶，因此，酸法能在最大程度上保持魚鰾膠原蛋白的三股螺旋結(jié)構(gòu)，保持天然活性，尤其適用于生物醫(yī)用材料的制備，將酸法和酶法相結(jié)合，可有效縮短膠原蛋白的提取時(shí)間，以及保證膠原蛋白中與活性相關(guān)的結(jié)構(gòu)的完整性，作用條件溫和，材料無(wú)毒，無(wú)污染。