[發明專利]用于檢測小麥網腥黑粉菌的SCAR標記引物及其應用

有效

• 申請號: 202110393743.X
• 申請日: 2021-04-13
• 公開（公告）號: CN112961935B
• 公開（公告）日: 2022-03-29
• 發明（設計）人: 高利;李天亞;陳榮臻
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院植物保護研究所
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12N15/11
• 代理公司: 北京海虹嘉誠知識產權代理有限公司 11129
• 代理人: 劉丹

1.用于鑒定小麥網腥黑粉菌(Tilletia tritici)的SCAR標記，其核苷酸序列如SEQ IDNO:1所示。

2.用于鑒定小麥網腥黑粉菌(Tilletia tritici)的SCAR標記引物，其核苷酸序列為：

Erc19 F：5’-CTTGTCCAAGCACGTACC-3’；

Erc19 R：5’-CTGCGCAGCGAGAGTAG-3’。

3.用于鑒定小麥網腥黑粉菌(Tilletia tritici)的試劑盒，其包含權利要求2所述的SCAR標記引物。

4.根據權利要求3所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包含PCR通用試劑。

5.一種鑒定小麥網腥黑粉菌(Tilletia tritici)的方法，包括如下步驟：

(1)提取待測樣品的DNA；

(2)以待測樣品的DNA為模板，使用權利要求2所述的SCAR標記引物進行PCR，得到擴增產物；

(3)通過凝膠電泳檢測擴增產物，若擴增產物中出現大小為266bp的條帶，則待測樣品中含有小麥網腥黑粉菌；若擴增產物中沒有出現大小為266bp的條帶，則待測樣品中不含有小麥網腥黑粉菌。

6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，所述待測樣品為小麥。

7.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，所述PCR的反應體系為：2×Pro TaqMaster Mix，12.5μl；ddH₂O，9.5μl；正向引物Erc19 F，1μl；反向引物Erc19 R，1μl；DNA模板，1μl；反應條件為：94℃ 30s；98℃ 10s，61.5℃ 30s，72℃ 1min，35個循環；72℃ 2min。

8.用于檢測小麥網腥黑粉菌(Tilletia tritici)的QPCR引物，其核苷酸序列如下：

Qerc19 F：5’-GCTTTCTGTTGTTTGCTGTTGA-3’；

Qerc19 R：5’-ATCGGCTGGCTGATGTCTATA-3’。

9.用于檢測小麥網腥黑粉菌(Tilletia tritici)的QPCR試劑盒，其包含權利要求8所述的QPCR引物。

10.權利要求2所述的SCAR標記引物或權利要求8所述的QPCR引物在鑒定小麥網腥黑粉菌(Tilletia tritici)中的應用。