[發明專利]一種以莖尖為外植體的植物組織培養快繁方法

有效

• 申請號: 202110392959.4
• 申請日: 2021-04-13
• 公開（公告）號: CN112931220B
• 公開（公告）日: 2022-05-27
• 發明（設計）人: 祝婷婷;任茂智;李林宣;方琳
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院都市農業研究所;成都農業科技中心
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 重慶雙馬智翔專利代理事務所(普通合伙) 50241
• 代理人: 顧曉玲

1.一種以莖尖為外植體的植物組織培養快繁方法，其特征在于，包括如下步驟：

（1）外植體的消毒處理：取植株上的莖尖作為外植體，表面消毒處理；所述植株為川芎或者豆薯或者四棱豆；

（2）生根培養：將消毒后的莖尖轉移到生根培養基上，在24～26℃、每天光照12～16小時、光照強度為1000～1500 Lx條件下進行培養；

川芎的生根培養基為1/2MS+IBA 0.2～0.5 mg/L+NAA 0～0.5 mg/L +蔗糖15～30 g/L+瓊脂6～10 g/L；

豆薯的生根培養基為MS+NAA 0.3～0.7 mg/L+IBA 0.5～2 mg/L+蔗糖15～30 g/L+瓊脂6～10 g/L；

四棱豆的生根培養基為MS+NAA 0～0.5 mg/L+IBA 0～2 mg/L+蔗糖15～30 g/L+瓊脂6～10 g/L；

（3）煉苗和移栽：在生根培養基中培養至莖尖基部再生的不定根長至1～4 cm時，打開瓶蓋，在室內進行煉苗后，將組培苗從培養瓶中取出，去掉根部的培養基，將其移栽至基質中種植。

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟（1）中所述莖尖為2 cm～5 cm長度，消毒是采用酒精和次氯酸鈉消毒。

3.如權利要求2所述的方法，其特征在于：步驟（1）中所述莖尖為2 cm～4 cm長度，所述消毒的方法具體指先將莖尖用水清洗，然后用酒精處理20～40 s，再用次氯酸鈉處理2～5min，最后用無菌水清洗干凈。

4.如權利要求3所述的方法，其特征在于：所述消毒的方法具體為：將莖尖在流水下小心沖洗1～2 h，然后在超凈臺中用無菌水清洗3次，接著用70％或75％酒精處理30 s，再用2%次氯酸鈉溶液處理4 min，最后用無菌水清洗3次。

5.如權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟（2）中的所述生根培養基中還含有頭孢霉素。

6.如權利要求5所述的方法，其特征在于：所述頭孢霉素在培養基中的濃度為300 mg/L。

7.如權利要求1所述的方法，其特征在于：所述川芎的生根培養基為1/2MS+IBA 0.2～0.4 mg/L+NAA 0.2～0.4 mg/L +蔗糖19～21 g/L+瓊脂7～9 g/L，pH5.6～5.8。

8.如權利要求7所述的方法，其特征在于：所述川芎的生根培養基為1/2MS+IBA 0.25mg/L+NAA 0.25 mg/L +蔗糖20 g/L+瓊脂8 g/L。

9.如權利要求1所述的方法，其特征在于：所述豆薯的生根培養基為MS+NAA 0.4～0.5mg/L+IBA 0.7～1.5 mg/L+蔗糖18～22 g/L+瓊脂6～10 g/L，pH5.6～5.8；

所述四棱豆的生根培養基為MS+蔗糖20 g/L+瓊脂8 g/L。

10.如權利要求9所述的方法，其特征在于：所述豆薯的生根培養基為MS+IBA 1 mg/L+NAA 0.5 mg/L +蔗糖20 g/L+瓊脂8 g/L。

11.如權利要求1所述的方法，其特征在于：所述步驟（3）中在生根培養基中培養至莖尖基部再生的不定根長至1～3 cm時，打開瓶蓋，在室內煉苗3～5天后移栽至基質中后按照川芎或豆薯或四棱豆的常規幼苗田間管理方法栽培管理。