[發(fā)明專利]一種以莖尖為外植體的植物組織培養(yǎng)快繁方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110392959.4
• 申請(qǐng)日: 2021-04-13
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN112931220B
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-05-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 祝婷婷;任茂智;李林宣;方琳
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院都市農(nóng)業(yè)研究所;成都農(nóng)業(yè)科技中心
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 重慶雙馬智翔專利代理事務(wù)所(普通合伙) 50241
• 代理人: 顧曉玲

1.一種以莖尖為外植體的植物組織培養(yǎng)快繁方法，其特征在于，包括如下步驟：

（1）外植體的消毒處理：取植株上的莖尖作為外植體，表面消毒處理；所述植株為川芎或者豆薯或者四棱豆；

（2）生根培養(yǎng)：將消毒后的莖尖轉(zhuǎn)移到生根培養(yǎng)基上，在24～26℃、每天光照12～16小時(shí)、光照強(qiáng)度為1000～1500 Lx條件下進(jìn)行培養(yǎng)；

川芎的生根培養(yǎng)基為1/2MS+IBA 0.2～0.5 mg/L+NAA 0～0.5 mg/L +蔗糖15～30 g/L+瓊脂6～10 g/L；

豆薯的生根培養(yǎng)基為MS+NAA 0.3～0.7 mg/L+IBA 0.5～2 mg/L+蔗糖15～30 g/L+瓊脂6～10 g/L；

四棱豆的生根培養(yǎng)基為MS+NAA 0～0.5 mg/L+IBA 0～2 mg/L+蔗糖15～30 g/L+瓊脂6～10 g/L；

（3）煉苗和移栽：在生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)至莖尖基部再生的不定根長(zhǎng)至1～4 cm時(shí)，打開(kāi)瓶蓋，在室內(nèi)進(jìn)行煉苗后，將組培苗從培養(yǎng)瓶中取出，去掉根部的培養(yǎng)基，將其移栽至基質(zhì)中種植。

2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：步驟（1）中所述莖尖為2 cm～5 cm長(zhǎng)度，消毒是采用酒精和次氯酸鈉消毒。

3.如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于：步驟（1）中所述莖尖為2 cm～4 cm長(zhǎng)度，所述消毒的方法具體指先將莖尖用水清洗，然后用酒精處理20～40 s，再用次氯酸鈉處理2～5min，最后用無(wú)菌水清洗干凈。

4.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于：所述消毒的方法具體為：將莖尖在流水下小心沖洗1～2 h，然后在超凈臺(tái)中用無(wú)菌水清洗3次，接著用70％或75％酒精處理30 s，再用2%次氯酸鈉溶液處理4 min，最后用無(wú)菌水清洗3次。

5.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：步驟（2）中的所述生根培養(yǎng)基中還含有頭孢霉素。

6.如權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于：所述頭孢霉素在培養(yǎng)基中的濃度為300 mg/L。

7.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述川芎的生根培養(yǎng)基為1/2MS+IBA 0.2～0.4 mg/L+NAA 0.2～0.4 mg/L +蔗糖19～21 g/L+瓊脂7～9 g/L，pH5.6～5.8。

8.如權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于：所述川芎的生根培養(yǎng)基為1/2MS+IBA 0.25mg/L+NAA 0.25 mg/L +蔗糖20 g/L+瓊脂8 g/L。

9.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述豆薯的生根培養(yǎng)基為MS+NAA 0.4～0.5mg/L+IBA 0.7～1.5 mg/L+蔗糖18～22 g/L+瓊脂6～10 g/L，pH5.6～5.8；

所述四棱豆的生根培養(yǎng)基為MS+蔗糖20 g/L+瓊脂8 g/L。

10.如權(quán)利要求9所述的方法，其特征在于：所述豆薯的生根培養(yǎng)基為MS+IBA 1 mg/L+NAA 0.5 mg/L +蔗糖20 g/L+瓊脂8 g/L。

11.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述步驟（3）中在生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)至莖尖基部再生的不定根長(zhǎng)至1～3 cm時(shí)，打開(kāi)瓶蓋，在室內(nèi)煉苗3～5天后移栽至基質(zhì)中后按照川芎或豆薯或四棱豆的常規(guī)幼苗田間管理方法栽培管理。