[發明專利]一種提高魚類子代成活率的方法

在審

• 申請號: 202110388908.4
• 申請日: 2021-04-12
• 公開（公告）號: CN113080114A
• 公開（公告）日: 2021-07-09
• 發明（設計）人: 邵建忠;項黎新;紀劍飛;胡崇彬;范東東;張楠
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: A01K61/13
• 分類號: A01K61/13;A61D7/00
• 代理公司: 杭州天正專利事務所有限公司 33201
• 代理人: 黃美娟;李世玉

本發明公開了一種提高魚類子代成活率的方法，所述方法是通過誘導母魚特異性抗體IgZ表達并傳遞給子代而實現的。本發明方法可以避免早期胚胎因某種病原感染引起的大規模死亡。通過流行病調查分析，提前對母魚進行相應病原疫苗免疫，誘導特異性IgZ的產生并傳遞到子代中，大大提高了子代的抵御能力。此外，該方法成本低，操作方便，效果明顯；只需對性成熟母魚進行免疫，就可獲得高免疫力的子代，節約了人工成本，采用腹腔注射，不受魚種規格等技術上的限制，在科研和生產上有廣闊的應用前景。周期短，在誘導產卵前14天對母魚免疫，就能獲得高IgZ滴度的子代。

(一)技術領域

本發明涉及水產生物技術和水產養殖病害防治領域，特別涉及一種提高魚類子代成活率的方法，通過魚類新型免疫球蛋白IgZ母源傳遞保護魚類仔魚免受病原侵害。

(二)背景技術

隨著水產養殖業的迅猛發展以及集約化水平的不斷提高，細菌性、病毒性及寄生蟲感染等各類水產病害日益突出，對漁業造成了巨大損失，嚴重制約了水產業健康可持續發展。長期以來由于缺乏有效的防治方法，各種抗生素、殺蟲劑的廣泛使用，造成了大面積養殖水環境的污染。這對于絕大多數卵生的魚類構成了很大的威脅，造成了大規模的魚苗死亡，其死亡率高達90％以上。胚胎和仔魚的高死亡率已經成為長期困擾魚類養殖業發展的一個關鍵問題。因此，研制開發天然、安全和高效的水產動物病害防治制劑及其應用技術是一項十分緊迫的任務。深入開展魚類母體傳遞免疫研究是從根本上解決魚苗成活率的關鍵。但長期以來，有關魚類母源傳遞及其對子代的保護作用研究起步較晚，進展緩慢。特別是關于母源傳遞的影響因素的認識還遠遠不夠。

IgZ最初在斑馬魚和虹鱒魚中被發現，后被證實存在于多種硬骨魚類中。近年來研究表明，IgZ與哺乳動物IgA類似的結構和功能，主要在腸、皮膚、鰓和鼻黏液中表達，在黏膜感染過程中發揮重要功能。但對其是否具有其他的生物學功能，如是否作為一種母源因子對魚類早期胚胎發育起到保護作用尚不清楚。

疫苗免疫被認為是最有效的防控措施，但目前無特定病原攜帶苗生成，因生產成本高和生產周期長等影響，制約了該項技術的發展。注射免疫受魚種規格和操作技術等限制，也難以在漁業生產中大規模推廣應用。

本發明首次揭示魚類IgZ作為母源傳遞抗體對子代發育起到保護作用，發現影響其傳遞的因素以及對子代保護的機制，實現對魚類病害的有效防治。功能機制研究表明，魚類早期胚胎中特異性IgZ能通過對母魚免疫特定抗原獲得，當病原入侵時，IgZ能夠通過發揮中和作用包被病原，形成一道屏障阻止病原入侵，從而獲得具有高免疫力的魚苗，提高魚苗成活率。本發明不僅豐富了魚類免疫學知識，而且為魚類病害的免疫防治開辟了新途徑，具有廣闊的應用前景。

(三)發明內容

本發明目的是提供一種提高魚類子代成活率的方法，所述方法是通過誘導母魚特異性抗體IgZ表達并傳遞給子代實現的，提高魚類子代免疫力，提高子代存活率，預防魚類病害。

本發明采用的技術方案是：

本發明提供一種提高魚類子代成活率的方法，所述方法是通過誘導母魚特異性抗體IgZ表達并傳遞給子代而實現的。

本發明采用疫苗制劑誘導母魚特異性抗體IgZ表達，通過母源傳遞，使子代能夠抵御特定抗原的入侵，從而起到保護作用，提高子代成活率，所述疫苗制劑包括但并不限于各種致病的細菌全菌滅活疫苗或病毒滅活疫苗，如遲緩愛德華氏菌(E.t)滅活疫苗或水皰性口炎病毒(VSV)滅活疫苗，能特異性誘導母魚產生針對E.t或VSV的IgZ抗體。

所述遲緩愛德華氏菌(E.t)滅活疫苗，是遲緩愛德華氏菌(E.t)經98℃金屬浴孵育半小時后制備得到。

所述水皰性口炎病毒(VSV)滅活疫苗，是水皰性口炎病毒(VSV)經98℃金屬浴孵育半小時后制備得到。