[發明專利]降低細胞剪切損傷的細胞凝膠制劑以及降低細胞剪切損傷的方法

在審

• 申請號: 202110386052.7
• 申請日: 2021-04-09
• 公開（公告）號: CN115192513A
• 公開（公告）日: 2022-10-18
• 發明（設計）人: 劉冬生;余家闊;楊勃;顏昕;李宇杰;周碧妮;李鑫
• 申請（專利權）人: 清華大學
• 主分類號: A61K9/06
• 分類號: A61K9/06;A61K47/26;A61K35/28;A61K45/06;A61P19/02;A61P29/00
• 代理公司: 北京坤瑞律師事務所 11494
• 代理人: 陳桉

1.一種細胞凝膠制劑，所述細胞凝膠制劑包含負載間充質干細胞的核酸水凝膠。

2.權利要求1的細胞凝膠制劑，其中所述核酸水凝膠包含：支架單元，該支架單元包含支架核心和與所述支架核心結合的至少三個單鏈核酸，每個單鏈核酸具備至少一個支架粘性末端；交聯單元，該交聯單元包含交聯核心和與所述交聯核心結合的至少兩個單鏈核酸，每個單鏈核酸具備至少一個交聯粘性末端；以及水性介質；其中所述支架單元與所述交聯單元通過所述支架粘性末端與所述交聯粘性末端以堿基互補配對的方式交聯而形成三維空間網絡結構。

3.權利要求1-2中任一項的細胞凝膠制劑，其中所述支架單元包含支架核心和與所述支架核心結合的至少三個單鏈核酸，每個單鏈核酸具備至少一個支架粘性末端；所述支架核心為核酸；所述支架核心的核酸具有互補配對區，該互補配對區的長度為4～150bp。

4.權利要求1-3中任一項的細胞凝膠制劑，其中所述交聯單元包含交聯核心和與所述交聯核心結合的至少兩個單鏈L-核酸，每個單鏈L-核酸具備至少一個交聯粘性末端；所述交聯核心為核酸；所述案交聯核心的核酸具有互補配對區，該互補配對區的長度為4～150bp。

5.權利要求1-4中任一項的細胞凝膠制劑，其中所述核酸水凝膠中的支架單元與交聯單元的摩爾比為2:1-1:3。

6.權利要求1-5中任一項的細胞凝膠制劑，其中所述支架單元、所述交聯單元以及所述三維空間網絡結構在生理條件下(37℃，pH 7.2～7.4,0.9wt％NaCl,等滲)處于穩定的交聯狀態。

7.權利要求1-6中任一項的細胞凝膠制劑，其中所述核酸水凝膠具有如在25℃和在1％應變的應變幅度下通過頻率掃描測量測得的，在0.1至100rad/s的所有應變值下，相對于損耗模量G”的占優勢的儲存模量G’。

8.權利要求1-7中任一項的細胞凝膠制劑，其中所述核酸水凝膠的支架單元或交聯單元包含CpG序列。

9.權利要求1-8中任一項的細胞凝膠制劑，其中所述間充質干細胞包埋或分散在所述核酸水凝膠中。

10.權利要求1-9中任一項的細胞凝膠制劑，其中所述間充質干細胞的密度為10⁵至10⁸個細胞/mL(每毫升細胞凝膠制劑)。

11.權利要求1-10中任一項的細胞凝膠制劑，其中所述細胞凝膠制劑進一步包括抗炎劑。

12.權利要求1-11中任一項所述的細胞凝膠制劑在制備用于治療或預防急性和慢性骨關節病以及炎性來源的相關癥狀的藥物中的用途。

13.使用權利要求1-11中任一項所述的細胞凝膠制劑降低剪切環境中細胞剪切損傷的方法，所述方法包括

(i)提供包括支架單元和交聯單元的核酸水凝膠，(ii)將間充質干細胞加載在核酸水凝膠中；或者

(i)分別制備核酸水凝膠的支架單元和交聯單元，(ii)將間充質干細胞與支架單元和交聯單元混合，通過自組裝得到核酸水凝膠。

14.權利要求13的方法，所述方法還包括使所述細胞凝膠制劑經受剪切環境。

15.權利要求14的方法，其中所述剪切環境包括注射過程和關節內內摩擦。