[發明專利]一種淚溝眼周塌陷自體修復復配液制備方法

在審

• 申請號: 202110385147.7
• 申請日: 2021-04-09
• 公開（公告）號: CN113082288A
• 公開（公告）日: 2021-07-09
• 發明（設計）人: 高玉紅;王密陽
• 申請（專利權）人: 北京美啦美健康管理有限公司
• 主分類號: A61L27/24
• 分類號: A61L27/24;A61L27/38
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種淚溝眼周塌陷自體修復復配液制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)收集成纖維細胞，低速離心后分離上清一和沉淀一；

(2)向沉淀一中加入細胞裂解液，充分裂解后低溫離心，收集上清二和沉淀二，將沉淀二利用蛋白酶酶解，終止酶解后高速離心取上清，得到上清三；

(3)合并上清一、上清二和上清三，得到上清液，將上清液經超高速離心后收集沉淀三；

(4)將沉淀二、透明質酸溶液將沉淀二和沉淀三制成凍干粉，按照重量比8～10:1混合，即得到所述自體膠原蛋白。

2.根據權利要求1所述的淚溝眼周塌陷自體修復復配液制備方法，其特征在于，所述成纖維細胞通過如下方式制備而成：收集皮膚標本，洗凈后剪碎，得到組織塊；將組織塊置于雙抗培養基中，培養至組織塊周圍爬出原代纖維細胞，待原代纖維細胞匯合度達到85％以上；取出組織塊，將原代纖維細胞按1:3傳代，即得到所述成纖維細胞。

3.根據權利要求1所述的淚溝眼周塌陷自體修復復配液制備方法，其特征在于，所述低溫離心的溫度為4℃以下，所述低溫離心力為1500～2000g，所述低溫離心的時間為8～10min。

4.根據權利要求1所述的淚溝眼周塌陷自體修復復配液制備方法，其特征在于，所述低溫離心力為2000g，所述低溫離心的時間為8min。

5.根據權利要求1所述的淚溝眼周塌陷自體修復復配液制備方法，其特征在于，所述高速離心的離心力為15000g及以上，離心時間為20～40min。

6.根據權利要求1所述的淚溝眼周塌陷自體修復復配液制備方法，其特征在于，所述高速離心的離心力為15000g，離心時間為20min。

7.根據權利要求1所述的淚溝眼周塌陷自體修復復配液制備方法，其特征在于，所述酶解時所用的蛋白酶包括胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶，所述胰蛋白酶的質量百分數為1.2～1.6％，所述胰凝乳蛋白酶的質量百分數為0.2～0.8％；所述酶解的時間為2～3h，所述酶解的溫度為45～50℃。

8.根據權利要求1所述的淚溝眼周塌陷自體修復復配液制備方法，其特征在于，所述超高速離心的離心力為140000g及以上，離心時間為2h～3h。

9.根據權利要求1所述的淚溝眼周塌陷自體修復復配液制備方法，其特征在于，所述超高速離心的離心力為150000g以上，離心時間為2h。

10.根據權利要求1所述的淚溝眼周塌陷自體修復復配液制備方法，其特征在于，所述沉淀二和沉淀三的重量比為9:1。