[發(fā)明專利]一種低毒性樣品生物毒性檢測(cè)的快速簡便預(yù)處理方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110384503.3
• 申請(qǐng)日: 2021-04-09
• 公開（公告）號(hào): CN113092705A
• 公開（公告）日: 2021-07-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 馬曉妍;林雨;陳文鳳;王曉昌;王永坤;李瑩;高子捷;孟子涵
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 西安建筑科技大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N33/18
• 分類號(hào): G01N33/18;G01N1/40
• 代理公司: 西安智大知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所 61215
• 代理人: 王晶

1.一種低毒性樣品生物毒性檢測(cè)的快速簡便預(yù)處理方法，其特征在于，包括以下步驟；

(1)按照標(biāo)準(zhǔn)采樣方法采集水環(huán)境中的低毒性水樣，過濾水樣，去除懸浮顆粒，盛于錐形瓶內(nèi)，然后用稀硫酸調(diào)節(jié)水樣pH，得到預(yù)處理樣品；采用有機(jī)溶劑和超純水依次活化HLB固相萃取小柱，得到活化后的HLB小柱；

(2)利用固相萃取裝置對(duì)步驟(1)中得到的預(yù)處理樣品在步驟(1)中得到的活化后HLB小柱進(jìn)行上樣；上樣結(jié)束后，再用超純水對(duì)上樣結(jié)束后的HLB小柱進(jìn)行清洗，并抽真空以排除小柱內(nèi)的水分，采用有機(jī)溶劑洗脫HLB小柱上富集的有機(jī)物，收集洗脫液，利用氮吹儀，調(diào)節(jié)水浴溫度，采用高純氮?dú)鈱⑾疵撘捍抵烈欢w積，得到樣品濃縮液；

(3)取步驟(2)中得到的樣品濃縮液40μL于白色96孔板中，設(shè)置三個(gè)平行樣，并使甲醇充分揮發(fā)，消除其對(duì)后續(xù)生物毒性測(cè)試的影響，待甲醇揮發(fā)后，加入后續(xù)生物毒性測(cè)試使用的溶液，充分再溶解污染物。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種低毒性樣品生物毒性檢測(cè)的快速簡便預(yù)處理方法，其特征在于，所述步驟(1)中，采用0.7μm玻璃纖維素膜過濾水樣，將盛于錐形瓶內(nèi)過濾后的溶液通過稀硫酸將水樣pH調(diào)至2～3。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種低毒性樣品生物毒性檢測(cè)的快速簡便預(yù)處理方法，其特征在于，所述步驟(1)中，選用的固相萃取柱為HLB固相萃取小柱，采用10mL色譜級(jí)甲醇溶液和10mL超純水活化小柱。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種低毒性樣品生物毒性檢測(cè)的快速簡便預(yù)處理方法，其特征在于，所述步驟(2)中調(diào)節(jié)固相萃取裝置的真空泵壓力使得水樣以2-3mL/min速度上樣。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種低毒性樣品生物毒性檢測(cè)的快速簡便預(yù)處理方法，其特征在于，所述步驟(2)中，再用10mL超純水對(duì)小柱進(jìn)行清洗，并抽真空30min以排除小柱內(nèi)的水分，采用10mL色譜級(jí)甲醇溶液洗脫富集的污染物，收集洗脫液，利用氮吹儀，調(diào)節(jié)水浴溫度為40℃，采用高純氮?dú)鈱⑾疵撘捍抵?mL。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種低毒性樣品生物毒性檢測(cè)的快速簡便預(yù)處理方法，其特征在于，所述步驟(3)中，加入樣品濃縮液的96孔板采用具有恒溫加熱功能的微孔板振蕩器揮發(fā)樣品中的甲醇。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種低毒性樣品生物毒性檢測(cè)的快速簡便預(yù)處理方法，其特征在于，所述步驟(3)中，甲醇的揮發(fā)操作過程具體參數(shù)為：加熱溫度為40℃，震蕩速度為500rpm，揮發(fā)時(shí)間為1h。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種低毒性樣品生物毒性檢測(cè)的快速簡便預(yù)處理方法，其特征在于，所述步驟(3)中，再溶解污染物的具體參數(shù)為：加熱溫度為40℃，震蕩速度為500rpm，時(shí)間為1h。