[發明專利]一種尿素酶活性快速篩查的凝膠試劑、試劑盒及快速篩查的方法

在審

• 申請號: 202110384243.X
• 申請日: 2021-04-09
• 公開（公告）號: CN113092459A
• 公開（公告）日: 2021-07-09
• 發明（設計）人: 許奕鵬;楊曉輝
• 申請（專利權）人: 許奕鵬
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78
• 代理公司: 中山市科創專利代理有限公司 44211
• 代理人: 毛海娟

本發明公開了一種尿素酶活性快速篩查的凝膠試劑、試劑盒及快速篩查的方法，屬于醫療檢測領域。尿素酶活性快速篩查的凝膠試劑包括0.2～0.3體積份的尿素；4～8體積份的酚紅；0.02～0.1體積份的proclin300；2～10體積份的pH緩沖液；5～15體積份的瓊脂凝膠，其中尿素濃度≥7mg/ml，酚紅濃度≥30×10^?3mg/ml。該檢測方法利用唾液中或活檢標本中尿素酶與尿素的反應產物引發相應指標變化來測定尿素酶活性。檢測步驟為：使用涂抹器裝置采集適量樣本，再使用涂抹器裝置將整個樣本從鑷子中推到試劑盒中的凝膠表面下方，使盡可能多的樣本暴露在凝膠中，靜止2～3min，目視法觀察凝膠顏色變化，若變紅，則為尿素酶陽性，若不變色，則為尿素酶陰性。

技術領域

本發明屬于醫療檢測領域，具體涉及一種尿素酶活性快速篩查的凝膠試劑、試劑盒及快速篩查的方法。

背景技術

羅賓醫生沃倫和馬歇爾在1982年首次從胃竇活檢中培養出這種細菌，稱之為彎曲桿菌樣細菌。后來，這個屬被命名為幽門螺桿菌，意思是螺旋狀或螺旋狀細菌。幽門螺旋桿菌已被證實可引起活動性慢性胃炎，是胃癌和粘膜相關淋巴型(MALT)淋巴瘤的危險因素。幽門螺旋桿菌寄生在人體消化道內，通常存在于胃黏膜上皮，亦可在口腔內繁殖。幽門螺旋桿菌所產生的尿素酶可迅速酶解尿素產生堿性的氨，所以幽門螺旋桿菌在胃內較不易受胃酸侵襲。

尿素酶是一種含鎳的寡聚酶，可由口腔內可能含有的唾液鏈球菌、內氏放線菌、沃氏葡萄球菌、幽門螺旋桿菌等細菌產生。尿素酶能夠引發多種人類疾病，與口腔相關的包括齲齒、牙周炎等。目前，尿素酶的檢測方法主要有納氏試劑比色法、拉曼光譜法、酚紅指示劑法、膠體金免疫層析法、精密試紙法等。納氏試劑含汞，拉曼光譜需使用硝酸銀等有毒試劑且設備普及率較低，因此兩種方法均未得到廣泛應用。以膠體金免疫層析法為基礎的唾液測試板、精密試紙法均可實現唾液中尿素酶的定性檢測。尿素酶具高度同源性且能將尿素迅速水解為二氧化碳和氨，并引起溶液pH變化，基于此原理，酚紅指示劑法可以快速定性胃粘膜等活體組織中的尿素酶。因此，發明一種以酚酞為指示劑快速篩查的凝膠試劑、尿素酶活性快速篩查的方法以及尿素酶活性檢測顯色時間快的檢測盒具有重要意義。

發明內容

本發明的目的在于：提供一種經改進后，檢查性能提高尿素酶活性凝膠試劑，便捷、操作簡單的尿素酶活性快速篩查的方法及試劑盒；該方法，只需要將采集樣品擦拭于檢測試劑的凝膠里，便可目視法直觀且快速的實驗檢測；利用樣品中的尿素酶與尿素的反應產物引發相應指標變化快速篩查幽門螺旋桿菌。

為了實現上述目的，本發明采取以下技術方案：

一種尿素酶活性快速篩查的凝膠試劑，包括以下體積份的組分：

本發明中，所述凝膠試劑中尿素濃度≥7mg/ml，優選7～20mg/ml，進一步地優選7mg/ml；酚紅濃度≥30×10^-3mg/ml，優選30×10^-3～50×10^-3mg/ml，進一步地優選30×10^-3mg/ml。

本發明中，pH緩沖液包括至少一酸和至少一堿混合而成，所述酸和堿均為可溶性的酸堿，且反應時不生成沉淀，也不與尿素發生化學反應。進一步地，優選pH緩沖液為2-(N-嗎啉)乙磺酸一水物和氫氧化鈉的混合物。

本發明中，pH緩沖液的pH調節至5～8，此條件下尿素酶的活性檢測效果好。

一種尿素酶活性快速篩查的試劑盒，包括一塑料玻璃片，所述玻璃片的中心設有一個下凹的塑料玻璃試劑杯，所述試劑杯中裝有所述尿素酶活性快速篩查的凝膠試劑，所述凝膠試劑是由尿素、pH指示劑酚紅、抑菌劑proclin300、pH緩沖液倒入瓊脂凝膠中均勻混合而成；塑料玻璃片上表面還貼有用于填寫被檢測者信息的標簽，所述下凹的塑料玻璃試劑杯由標簽密封遮蓋。

本發明還包括一種尿素酶活性快速篩查的方法，具體步驟如下：