[發明專利]一種快速檢測組胺的方法

在審

• 申請號: 202110382350.9
• 申請日: 2021-04-09
• 公開（公告）號: CN113092442A
• 公開（公告）日: 2021-07-09
• 發明（設計）人: 賴克強;張苑怡;寧海花;苗軍艦;曲映紅
• 申請（專利權）人: 上海海洋大學
• 主分類號: G01N21/65
• 分類號: G01N21/65
• 代理公司: 上海唯智贏專利代理事務所(普通合伙) 31293
• 代理人: 吳瑾瑜

本發明屬于食品安全檢測領域，提供了一種快速檢測組胺的方法，步驟包括，以金核銀殼納米溶膠為增強基底，應用對組胺有選擇性吸附的分子印跡聚合物結合表面增強拉曼光譜技術檢測樣品，對樣品中低濃度組胺SERS信號變化有著明顯響應，可用于檢測水產品，例如魚肉中的痕量組胺。本發明檢測方法能夠簡便、快捷、準確地實現組胺定性和定量檢測，靈敏度好，選擇性高。

技術領域

本發明屬于食品安全檢測領域，具體為一種快速檢測組胺的方法，尤其涉及利用分子印跡-表面增強拉曼光譜(SERS)聯用技術快速檢測魚肉中組胺的方法。

背景技術

組胺又名組織胺，分子式為C₅H₉N₃，化學名為4(5)-(2-氨乙基)咪唑。組胺是一種生物胺,也是對人體健康影響最大的一種多胺類物質，主要由生物體內的組氨酸經過組胺酸脫羧酶脫羧反應生成。新鮮水產品中組胺含量較低，但當魚肉儲存不當、腐爛變質時，會產生大量的組胺。因此，國外及我國均制定了組胺在水產品及其制品中的最高殘留限量標準：美國食品和藥物管理局規定食用魚肉中組胺含量不能高于50mg/kg；澳大利亞和歐盟對水產品中的組胺含量提出了嚴格要求，并規定水產品及其制品中組胺含量不得高于100mg/kg；我國的國家標準《GB 2733-2015》也規定鮐魚、鯖魚、金槍魚等高組胺魚類和其他海水魚類中的組胺限量分別為400mg/kg和200mg/kg。近年來，全國各地乃至全球范圍內的沿海地區組胺中毒事件頻發，考慮到組胺的潛在危險性，建立食品中組胺快速檢測方法對食品安全監管具有重要的現實意義。

傳統的組胺檢測方法有高效液相色譜法、液質聯用法、毛細管電泳法、酶聯免疫法等，這些方法存在前處理復雜、分析時間長、檢測成本高等缺點，現有技術所提供的檢測食品中組胺的方法并不能達到快速、廉價、準確和靈敏的檢測效果。

以拉曼散射為基礎建立的表面增強拉曼光譜(surface-enhanced Ramanspectroscopy，SERS)通過將待測物分子吸附在粗糙金屬材料表面，可使待測物的拉曼信號增強10⁴～10¹⁰倍，使得一些微量和痕量物質得以檢出。SERS技術為食品等復雜體系中痕量物質的檢測提供一種新的途徑，現已廣泛用于食品中痕量化學物質的分析。現有技術中采用銀納米粒子溶膠利用SERS檢測技術對組胺分子進行檢測(等人，2016)，檢測限為111.2mg/kg，但低于111.2mg/kg濃度的組胺含量依然能通過積累效應對人體產生毒害。

水產品尤其是魚肉中基質成分復雜，蛋白質、脂肪、水分等物質會影響待測化學分子與基底結合，進而影響檢測結果靈敏度。分子印跡聚合物(molecularly imprintedpolymers，MIPs)是基于分子印跡技術制備對目標分子具有高選擇性的高分子材料，能夠在復雜基質中特異性識別和分離出目標分子,從而達到有效分離和富集的作用。因此通過對現有SERS前處理方法加以改進，添加分子印跡聚合物，有效減少魚肉樣品中基質成分的影響，從而提供一種能夠快速、高效、準確的測定出魚肉樣品中痕量的組胺的方法。

發明內容

本發明的目的在于解決上述問題，基于分子印跡-SERS聯用技術，提供一種高效、準確的魚肉中組胺的快速檢測方法。

本發明技術方案為：

一種快速檢測組胺的方法，步驟包括：

將待測樣品與分子印跡聚合物材料混勻后，將樣品-分子印跡聚合物材料混合物與金核銀殼納米溶膠混勻，并烘干后進行SERS測試；所述的分子印跡材料以組胺為模板分子制備。

所述的金核銀殼納米金屬溶膠粒徑為21-29nm，其中金核的粒徑為18±2nm。優選的，所述的金核銀殼納米溶膠粒徑為27nm±2nm。

所述的分子印跡聚合物對組胺有吸附作用，其制備方法為：以組胺為模板分子，與功能單體和交聯劑混合，加入引發劑，利用本體聚合方法合成分子印跡材料。聚合后洗滌去除模板分子組胺。