[發明專利]擴增培養基及其在NK細胞培養中的應用在審
| 申請號： | 202110382323.1 | 申請日： | 2021-04-09 |
| 公開（公告）號： | CN113025572A | 公開（公告）日： | 2021-06-25 |
| 發明（設計）人： | 劉年 | 申請（專利權）人： | 太東（鎮江）生物科技有限公司 |
| 主分類號： | C12N5/0783 | 分類號： | C12N5/0783 |
| 代理公司： | 北京華進京聯知識產權代理有限公司 11606 | 代理人： | 王勤思 |
| 地址： | 212009 江蘇省鎮江市新區*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 擴增 培養基 及其 nk 細胞培養 中的 應用 | ||
本發明涉及細胞培養技術領域，具體而言，涉及一種擴增培養基及其在NK細胞培養中的應用。該培養基包括無血清培養基KBM 581以及添加于其中的添加劑；所述添加劑包括：聚乙烯吡咯烷酮5mg/mL～0mg/mL；黃芪多糖10mg/mL～40mg/mL；IL?2 50U/mL～500U/mL；IL?12 10U/mL～100U/mL；IL?15 10U/mL～80U/mL；以及CD16單抗1μg/mL～6μg/mL。
技術領域
本發明涉及細胞培養技術領域，具體而言，涉及一種擴增培養基及其在NK細胞培養中的應用。
背景技術
免疫治療在21世紀隨著生命科學的發展蓬勃興起，是現代生物醫藥的產業中發展最快的領域之一。NK細胞(自然殺傷細胞)是一種重要的免疫細胞，分布于外周血、脾臟、淋巴等組織。NK細胞在體內可以清除感染細胞、腫瘤細胞等異常細胞，切與其他免疫細胞不同，NK細胞不需要依靠免疫系統指令或其他細胞配合，自己即可識別、攻擊異常細胞。但自然條件下NK細胞僅占外周血淋巴細胞的5％～15％，含量較低，在免疫治療的臨床使用上需要一種穩定的體外擴增技術，包括特定的培養基以及培養方法。
現有的NK細胞培養基多為基礎細胞培養基添加細胞因子后在培養瓶中靜置培養，受限于培養瓶培養方式導致細胞擴增數量少，效率低。也有使用生物反應器擴增NK細胞的嘗試，但由于對細胞剪切力的應對方法不足，導致NK細胞容易受到攪拌槳葉和氣泡破裂產生的細胞剪切力的傷害導致細胞死亡，影響培養效率和培養環境。
有鑒于此，特提出本發明。
發明內容
本發明主要解決現有的NK細胞體外擴增效率較低的問題，提供一種擴增培養基，以及使用該培養基有效于生物反應器高效體外擴增NK細胞的方法。
為了實現本發明的上述目的，特采用以下技術方案：
根據本發明的第一方面，本發明涉及一種擴增培養基，其包括無血清培養基KBM581以及添加于其中的添加劑；
所述添加劑包括：
聚乙烯吡咯烷酮(polyvinyl pyrrolidone，PVP) 5mg/mL～10mg/mL；
黃芪多糖 10mg/mL～40mg/mL；
IL-2 50U/mL～500U/mL；
IL-12 10U/mL～100U/mL；
IL-15 10U/mL～80U/mL；以及
CD16單抗 1μg/mL～6μg/mL。
可選的，如上所述的擴增培養基，所述添加劑包括：
聚乙烯吡咯烷酮 6mg/mL～9mg/mL；
黃芪多糖 20mg/mL～30mg/mL；
IL-2 150U/mL～400U/mL；
IL-12 30U/mL～80U/mL；
IL-15 20U/mL～70U/mL；以及
CD16單抗 2μg/mL～5μg/mL。
可選的，如上所述的擴增培養基，所述添加劑包括：
聚乙烯吡咯烷酮 7mg/mL～8mg/mL；
黃芪多糖 22mg/mL～28mg/mL；
IL-2 200U/mL～350U/mL；
IL-12 40U/mL～70U/mL；
IL-15 30U/mL～60U/mL；以及
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