[發明專利]一種專殺真菌的抗菌肽GL4W及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 202110381041.X
• 申請日: 2021-04-09
• 公開（公告）號: CN113214355B
• 公開（公告）日: 2022-02-25
• 發明（設計）人: 單安山;宋靜;張珊珊;王梓航
• 申請（專利權）人: 東北農業大學
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;C07K1/06;C07K1/04;C07K1/20;A61K38/08;A61P31/10
• 代理公司: 哈爾濱市哈科專利事務所有限責任公司 23101
• 代理人: 吳振剛

本發明提供一種專殺真菌的抗菌肽GL4W及其制備方法和應用，抗菌肽GL4W其序列如SEQ ID No.1所示。以抗菌肽L4(RLRLLLRLR)為活性中心，在其N端用甘氨酸形成帽子結構并在其C端添加色氨酸形成尾端錨定結構設計出抗菌肽，命名為GL4W。抗菌肽GL4W在制備治療真菌引發的感染性疾病藥物中的應用。本發明改變了抗菌肽L4的抗菌譜，成為一種專殺真菌的抗菌肽，并且提高了抗菌肽對細菌細胞的選擇性，其成為抗真菌感染藥物的發展潛力，抗菌肽GL4W的治療指數高達39.61。

技術領域

本發明屬于生物技術領域，具體涉及一種專殺真菌的抗菌肽GL4W及其制備方法和應用。

背景技術

全球真菌感染率繼續上升，真菌感染正在給全球醫療保健系統帶來越來越大的臨床負擔，但可以對抗這些疾病的治療選擇仍然僅限于四種主要的抗真菌藥物類別，即多烯類、三唑類、尼可霉素類和棘白菌素類。由于真核病原體中的一些有效藥物靶點往往與人類基因/基因產物所共有，導致開發安全/無毒的抗真菌藥物比開發抗細菌藥物更具挑戰性。

抗菌肽是動物機體抵御外界微生物侵害及清除體內突變細胞的一類小分子多肽，具有廣譜抗菌、無毒性、無耐藥性、無殘留與無污染等優點，而且其熱穩定性好，添加劑量小，完全符合畜產品安全生產的需要，適合在飼料生產過程中使用，極具有作為新一代飼料添加劑的潛質。而且抗菌肽的抑菌機理與抗生素不同，抗菌肽是通過破壞細菌的細胞膜結構，使細胞內溶物外泄，從而殺死細胞，所以不易產生耐藥性。更為重要的是，抗菌肽對真核細胞幾乎沒有作用，只作用于原核細胞和發生病變的真核細胞。據上述原因，抗菌肽完全有可能取代抗生素成為一類新型、高效、低毒、無殘留的抗菌物質，具有廣闊的應用前景。

雖然現有的一種抗菌肽L4(RLRLLLRLR-NH2)具有較好的抗真菌(GM＝8.00μM)與抗細菌(GM＝4.76μM)的抗菌活性，但其抗菌譜較廣，而廣譜抗菌藥物的使用對機體菌群平衡的破壞能夠引起繼發感染且更易產生耐藥性。

發明內容

基于以上不足之處，本發明的目的在于提供一種專殺真菌的抗菌肽GL4W，其沒有抗細菌的活性，是一種專殺真菌的抗菌肽。

本發明的目的通過如下技術實現：一種專殺真菌的抗菌肽GL4W，其序列如SEQ IDNo.1所示。

本發明的另一目的是提供一種專殺真菌的抗菌肽GL4W的制備方法，如下：

(1)以抗菌肽L4為活性中心，其氨基酸序列為：RLRLLLRLR，在其N端用甘氨酸形成帽子結構，并在其C段添加色氨酸形成尾端錨定結構；

(2)采用固相化學合成法通過多肽合成儀得到肽樹脂，將得到的肽樹脂經過TFA切割后，得到抗菌肽GL4W；

(3)經過反相高效液相色譜純化和質譜鑒定后，即完成抗菌肽GL4W的制備。

進一步的，本發明的另一目的是提供一種專殺真菌的抗菌肽GL4W在制備治療真菌引發的感染性疾病藥物中的應用。

本發明具有如下優點及有益效果：抗菌肽GL4W具有很高的細胞選擇性，對得到的抗菌肽進行抗細菌、抗真菌和溶血活性檢測，發現抗菌肽GL4W對13種細菌(革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌)沒有抗菌活性，但對白色念珠球菌等13種真菌有明顯的抑制作用，且幾乎沒有溶血活性。GL4W的治療指數高達39.61。綜上所述，GL4W是一種具有較高應用價值的抗真菌肽。

附圖說明

圖1為抗菌肽GL4W的質譜圖。

具體實施方式

下面結合實施例及附圖對本發明作進一步詳細的描述，但本發明的實施方式不限于此。

實施例1

抗菌肽的設計