[發明專利]試劑、血液細胞分析方法及分析儀

在審

• 申請號: 202110379515.7
• 申請日: 2021-04-08
• 公開（公告）號: CN115201161A
• 公開（公告）日: 2022-10-18
• 發明（設計）人: 陳庚文;張子千
• 申請（專利權）人: 深圳邁瑞生物醫療電子股份有限公司
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64;G01N21/49;G01N21/75;G01N33/58;G01N15/14
• 代理公司: 深圳鼎合誠知識產權代理有限公司 44281
• 代理人: 李小焦;郭燕

本申請公開了一種試劑、血液細胞分析方法及分析儀。本申請的試劑包括作為溶血試劑的第一試劑，和第二試劑；第二試劑為糖蛋白特異性染料。利用本申請的試劑體系，在溶血情況下進行血小板檢測，能夠根據熒光強度信息有效區分溶血后的紅細胞碎片與血小板，從而提高了血小板檢測的準確性。并且，在溶血情況下，在同一通道的一次測試中，還能夠同時實現白細胞的區分和檢測，從而簡化了血液檢測、降低了檢測成本。

技術領域

本申請涉及血液細胞檢測技術領域，特別是涉及一種試劑、血液細胞分析方法及分析儀。

背景技術

人血液中含有紅細胞、白細胞、血小板等各種細胞。其中血小板是直徑為2-3微米的無核細胞，正常人的血液中每微升含有15萬-35萬個血小板。

眾所周知，血小板的常用測定方法之一是電阻抗法。該方法是測定待測血液樣本從兩個電極間通過時的電阻脈沖，將其繪制成直方圖進行分析。原則上，電阻脈沖的強度與待測血液樣本中細胞的體積相關；因此可以通過分析電阻脈沖的直方圖判斷待測血液樣本中是否含有血小板，從而實現血小板檢測。然而，電阻抗法在測試某些特殊樣本時會影響血小板的測試準確性和精確度；例如，含大血小板和小紅細胞的樣本，這種樣本中大血小板的體積與小紅細胞體積類似，因此難以通過電阻抗法進行區分。

針對電阻抗法無法進行區分的情況，有研究提出用對血小板的表面抗原有特異性的標記抗體對血小板進行計數的方法，例如美國臨床病理學雜志(2001):115,p460-464。但是，這種方法在測試過程中需要使用抗原抗體反應，一般需要花很長時間才能得到結果；因此，該方法不能滿足臨床上需要緊急檢測血小板進行判斷的使用需求，例如判斷是否需要輸血等需緊急情況。

流式細胞技術可以迅速測定血液中的細胞，已廣泛用于血液細胞的檢測，比如美國專利6114173號、4882284號及5891731號都公開了在非溶血條件下，利用染料對血細胞進行染色區分，然后采用流式細胞技術進行血小板或其它血細胞檢測。但是，在血液中有時會出現破碎紅細胞和脂質等，其大小與血小板類似，因此會在測定時作為雜質影響血小板測定，特別是在測定需要輸血的血小板低的樣本，這些雜質的影響會更大。

針對以上問題，SYSMEX公司的專利CN 101173921公開了一種能夠有效的從血細胞和脂質顆粒等血液中的雜質中區分出血小板加以測定的技術，其中記述了一類對血小板具有較好特異性的染料，能夠在熒光方向有效的區分血小板和血細胞中的雜質。但這種方法需要在單獨的測試通道中進行，并且其對紅細胞碎片和血小板不能夠有效的區分，在臨床上檢驗一些紅細胞易碎樣本就會產生較大的干擾。因此在檢驗血小板時，有效的區分血小板和紅細胞碎片及其它可能的雜質就顯得尤為重要。

綜上所述，開發一種便捷、快速、準確的血小板檢測技術，仍然是臨床檢驗的迫切需要。

發明內容

本申請的目的是提供一種新的試劑，基于該試劑的血液細胞分析方法以及血液細胞分析儀。

為了實現上述目的，本申請采用了以下技術方案：

本申請的第一方面公開了一種試劑，該試劑包括作為溶血試劑的第一試劑，和第二試劑；第二試劑為糖蛋白特異性染料。

需要說明的是，本申請的試劑用于血液細胞檢測，在溶血情況下，由于采用糖蛋白特異性染料進行染色，能夠通過染色后的熒光強度信息區分紅細胞碎片和血小板。本申請的試劑只需要采用一種光學信號即熒光信號，就能實現血小板的準確檢測；采用本申請的試劑進行血小板檢測具有便捷、快速、準確等優點；能夠很好的滿足臨床使用需求。