[發明專利]一種骨髓間充質干細胞培養基及其應用

有效

• 申請號: 202110377506.4
• 申請日: 2021-04-08
• 公開（公告）號: CN112941022B
• 公開（公告）日: 2022-07-08
• 發明（設計）人: 趙光鋒;李明揚;李春慧;王洋洋
• 申請（專利權）人: 南京生航生物技術有限公司
• 主分類號: C12N5/0775
• 分類號: C12N5/0775;A61K8/99;A61K35/28;A61P17/18;A61Q19/08
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責任公司 32218
• 代理人: 傅婷婷;徐冬濤

本發明公開了一種培養骨髓間充質干細胞專用培養基及其應用。該培養基還包括基質金屬蛋白酶2(MMP2)。實驗證實，含MMP2培養基處理的BMSC其表型不變，但是生長速度明顯增加。因此，這種含MMP2的培養基可用于骨髓來源MSC的培養，使其在臨床治療及美容等方面發揮更有效的作用。

技術領域

本發明屬于生物技術領域，具體涉及一種骨髓間充質干細胞培養基及其應用。

背景技術

間充質干細胞(MSC)目前被廣泛應用于臨床組織修復、自身免疫病治療以及美容等行業。在機體內，MSC存在于骨髓、胎盤、臍帶、羊膜、脂肪等組織中，尤以骨髓中數量較多、分化能力最強。不同來源的間充質干細胞雖然在分子標志物表達方面有相似性，但是在生長及功能方面存在明顯的器官特異性。這表明間充質干細胞生存的微環境對間充質干細胞的生長和功能有著至關重要的影響。因此，需要一種BMSC專用培養基。

發明內容

針對現有技術的不足，本發明的目的在于提供一種培養BMSC專用培養基及其應用，含有MMP2的培養基培養得到的間充質干細胞生長速度快，所得間充質干細胞適合用于制備臨床治療或美容類產品。

本發明在體外培養骨髓間充質干細胞(BMSC)時發現，其生長速度明顯低于脂肪等來源的間充質干細胞。因此，我們通過質譜分析BMSC及脂肪MSC培養上清中的蛋白成分，來尋找可促進BMSC生長的關鍵因子。質譜結果顯示，脂肪MSC上清中基質金屬蛋白酶2(MMP2)的含量明顯高于BMSC。我們用添加MMP2的培養基來培養BMSC時發現，BMSC的生長速度明顯增加，且不改變間充質干細胞表型。但是當MMP2含量大于200ug/L時，細胞增殖受限。

一種培養BMSC專用培養基,包括基礎培養基，還包括MMP2，所述MMP2的濃度為20-50μg/L。

作為本發明的一種優選，所述基礎培養基為DMEM-F12基礎培養基。

作為本發明的進一步優選，所述的專用培養基中還包括nutridoma 0.2-1mg/ml，青鏈霉素雙抗100單位/ml，丙酮酸5-20mg/L，L-谷氨酰胺3-6mg/ml。

上述專用培養基在制備藥物或美容產品中的應用。

作為本發明的一種優選，使用所述的專用培養基培養骨髓間充質干細胞，所得骨髓間充質干細胞作為所述的藥物或美容產品的有效成分。

一種治療藥物，其活性成分為上述培養得到的間充質干細胞，濃度為1×10⁵-1×10⁷個/ml。

一種抗衰老美容產品，其活性成分為上述培養得到的間充質干細胞，濃度為1×10⁵-1×10⁷個/ml。

有益效果：

與現有技術相比，將特定濃度MMP2加入培養來源于骨髓的MSC的培養基后，MSC的生長速度加快。另外，用本發明的MSC制成的臨床治療藥物或美容產品上的效果明顯。

附圖說明

圖1為蛋白質譜分析脂肪來源MSC(A-MSC)與骨髓來源MSC(B-MSC)培養上清中蛋白表達情況；

圖2為含MMP2培養基培養BMSC后，其表面標志物的表達分析；

圖3為含MMP2培養基培養BMSC后，MSC增殖能力的改變。

具體實施方式

實施例1蛋白質譜分析脂肪來源MSC(A-MSC)與骨髓來源MSC(B-MSC)培養上清中蛋白表達情況。

1、材料和方法

1.1主要試劑