[發明專利]一種臭氧水與木霉菌組合防治白菜根腫病的方法

有效

• 申請號: 202110377096.3
• 申請日: 2021-04-08
• 公開（公告）號: CN112868675B
• 公開（公告）日: 2022-03-08
• 發明（設計）人: 魏艷麗;李紀順;李紅梅;扈進冬;趙忠娟;陳凱;楊合同
• 申請（專利權）人: 山東省科學院生態研究所（山東省科學院中日友好生物技術研究中心）
• 主分類號: A01N63/38
• 分類號: A01N63/38;A01P21/00;A01P3/00;C09K17/02
• 代理公司: 濟南舜源專利事務所有限公司 37205
• 代理人: 侯緒軍

1.一種臭氧水與木霉組合防治白菜根腫病的方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)使用濃度為6～10mg/L的臭氧水澆灌土壤，每畝土壤澆灌70～100m³臭氧水；

(2)待土壤含水量自然蒸發降至可機械整地時，施用哈茨木霉制劑作為基肥，每畝土壤所施用的哈茨木霉制劑中有效活菌數為(0.5～5)×10¹²CFU；

哈茨木霉制劑為哈茨木霉TW21990制劑，哈茨木霉TW21990已于2016年9月1日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏地址為北京市朝陽區北辰西路1號院3號，保藏編號為CGMCC No.12864，分類命名為哈茨木霉Trichoderma harzianum；

(3)播種前使用深綠木霉制劑對白菜種子拌種，每150g白菜種子用5g深綠木霉制劑拌種，深綠木霉制劑的有效活菌數為(1～10)×10⁸CFU/g；

深綠木霉制劑為深綠木霉HB20111制劑，深綠木霉HB20111已于2018年12月5日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏地址為北京市朝陽區北辰西路1號院3號，保藏編號為CGMCC No.16963，分類命名為深綠木霉Trichoderma atroviride。

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(1)中，根據土壤中蕓薹根腫菌基數確定臭氧水濃度，土壤中蕓薹根腫菌基數大于10⁶CFU/g時，選擇臭氧水濃度為8～10mg/L；土壤中蕓薹根腫菌基數小于等于10⁶CFU/g時，選擇臭氧水的濃度為6～8mg/L。

3.如權利要求2所述的方法，其特征在于，步驟(1)中，土壤中蕓薹根腫菌基數的確定方法為：

提取土樣DNA，利用蕓薹根腫菌特異性引物PBF和PBR進行qPCR擴增，計算土壤中蕓薹根腫菌基數，其中PBF序列為5'-GAACGGGTTCACAGACTAGAT-3'，PBR序列為5'-GCCCACTGTGTTAATGATCC-3'。

4.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(1)中，臭氧水采用多點灌溉。

5.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(2)中，哈茨木霉制劑的制備方法為哈茨木霉通過發酵制備分生孢子，添加草炭土和/或麥飯石，制得有效活菌數為(1～10)×10⁸CFU/g的哈茨木霉制劑。

6.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(2)還包括向土壤施用500～1000kg蘑菇渣和/或200kg生物有機肥。

7.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(3)中，深綠木霉制劑的制備方法為以麥飯石為載體，按質量百分比加入海藻酸鈉1％、羧甲基纖維素鈉2％、氯化鈣0.2％和深綠木霉，制得有效活菌數為(1～10)×10⁸CFU/g的深綠木霉制劑。