[發明專利]一種水稻OsSagB基因及其在抗硝基化合物污染中的應用有效
| 申請號： | 202110376394.0 | 申請日： | 2021-06-02 |
| 公開（公告）號： | CN113174394B | 公開（公告）日： | 2022-11-11 |
| 發明（設計）人： | 楊澤峰;陳茹佳;皇甫列翔;陳志陽;魯月;徐辰武;徐揚;李鵬程 | 申請（專利權）人： | 揚州大學 |
| 主分類號： | C12N15/53 | 分類號： | C12N15/53;C12N9/04;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/46 |
| 代理公司： | 南京蘇科專利代理有限責任公司 32102 | 代理人： | 徐素柏 |
| 地址： | 225009 *** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 水稻 ossagb 基因 及其 硝基 化合物 污染 中的 應用 | ||
1.一種水稻OsSagB基因的應用，所述水稻OsSagB的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，其特征在于，通過OsSagB基因在水稻植株上的過表達，以提高水稻抗TNT硝基化合物的耐受性。
2.一種水稻OsSagB基因的應用，所述水稻OsSagB的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，其特征在于，用于植物修復TNT硝基化合物污染。
3.一種提高水稻抗TNT硝基化合物污染的方法，首先將核苷酸序列如SEQ ID No.1所示水稻OsSagB基因連接至載體pCAMBIA1390上，構建重組載體pCAMBIA1390-OsSagB，其特征在于，再將所述pCAMBIA1390-OsSagB重組載體轉入根癌農桿菌，轉至水稻植株中，得到陽性OsSagB基因過表達的水稻植株，所述水稻植株可提高水稻抗TNT硝基化合物的污染。
4.根據權利要求3所述的提高水稻抗TNT硝基化合物污染的方法，其特征在于，所述重組載體pCAMBIA1390-OsSagB的構建方法為：
1）提取水稻葉片總RNA，將總RNA反轉錄為cDNA，以所述cDNA第一鏈為模板用擴增引物對，采用高保真KOD FX酶進行PCR擴增，利用瓊脂糖凝膠試劑盒進行回收，得到核苷酸序列如SEQ ID No.1所示水稻OsSagB基因序列的擴增產物；
所述擴增引物包括擴增上游引物和擴增下游引物，所述擴增上游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.7所示，擴增下游引物如SEQ ID No.8所示；
2）用限制性內切酶KpnI和SpeI酶切pCAMBIA1390載體，得到酶切載體；
3）將步驟1）獲得的擴增產物的基因片段與步驟2）獲得的酶切載體進行連接獲得重組載體pCAMBIA1390-OsSagB。
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