[發(fā)明專(zhuān)利]鴿新城疫高免卵黃抗體及其制備方法和應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110376369.2
• 申請(qǐng)日: 2021-04-01
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN113121679B
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-08-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王瑋;錢(qián)晶
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 仲愷農(nóng)業(yè)工程學(xué)院;江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院
• 主分類(lèi)號(hào): C07K16/10
• 分類(lèi)號(hào): C07K16/10;C07K16/02;A61K39/42;A61P31/14
• 代理公司: 長(zhǎng)春眾邦菁華知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 22214
• 代理人: 于曉慶

一種鴿新城疫高免卵黃抗體及其制備方法和應(yīng)用，屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明利用鴿源基因VI型新城疫病毒rVI?HZ株(該鴿源基因VI型新城疫病毒rVI?HZ株于2020年12月10日保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏號(hào)為：CCTCC NO：V202083)制備鴿新城疫病毒滅活疫苗，免疫蛋雞后收集雞蛋，采用聚乙二醇(PEG)法純化卵黃抗體，獲得鴿新城疫病毒高免卵黃抗體。本發(fā)明制備的鴿新城疫病毒高免卵黃抗體的血凝抑制效價(jià)高達(dá)15log₂，中和活性為13log₂，可用于治療鴿新城疫病毒感染，具有良好的應(yīng)用前景。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體公開(kāi)了一種鴿新城疫高免卵黃抗體及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)

新城疫(ND)是由新城疫病毒(NDV)強(qiáng)毒株感染引起的一種急性、高度接觸性禽類(lèi)烈性傳染病，是《國(guó)家中長(zhǎng)期動(dòng)物疫病防治規(guī)劃(2012-2020年)》中優(yōu)先防制的一類(lèi)動(dòng)物疫病之一。

NDV為副黏病毒科副黏病毒屬的禽副黏病毒I型，基因組為不分節(jié)段的單股負(fù)鏈RNA，基因組結(jié)構(gòu)模式為3’-NP-P-M-F-HN-L-5’，依次編碼六種結(jié)構(gòu)蛋白：核衣殼蛋白(Nucleocapsidprotein，NP)、磷蛋白(Phosphorprotein，P)、基質(zhì)蛋白(Matrixprotein，M)、融合蛋白(Fusionprotein，F(xiàn))、血凝素-神經(jīng)氨酸酶蛋白(Heamagglutinin-Neuraminidaseprotein，HN)和大分子蛋白(Large protein，L)。NDV仍只一個(gè)血清型，但根據(jù)F基因高變區(qū)的遺傳進(jìn)化分析可將所有毒株分為ClassⅠ和ClassⅡ大類(lèi)，其中ClassⅠ又可分為3個(gè)基因型，ClassⅡ分為至少20個(gè)基因型。分子流行病學(xué)研究結(jié)果表明，目前在我國(guó)雞、鴨、鵝群中流行的NDV以ClassⅡ中的基因VII型為主，鴿群中流行的NDV以ClassⅡ中的基因VI型為主(潘群興，等。新城疫不同宿主源分離株的生物學(xué)特性[J].江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2011，27(6):1325-1329.)。不同地區(qū)、不同時(shí)間分離的NDV在抗原性、致病性和毒力存在著差異。

20世紀(jì)70年代末在中東地區(qū)首先發(fā)現(xiàn)鴿新城疫。該病于1981年在非洲流行后傳至歐洲大陸及美國(guó)，隨后在日本大流行。大約在1985年底，隨進(jìn)口鴿傳入中國(guó)，1986年間，中國(guó)的福州、上海、北京各地多有此病發(fā)生。

目前，治療鴿新城疫沒(méi)有特效藥，采用高免卵黃抗體治療是防治本病最有效的手段之一。在現(xiàn)實(shí)情況下，禽群一旦發(fā)生新城疫，再補(bǔ)接種疫苗為時(shí)已晚，造成的損失巨大。臨床上，通常采用以新城疫卵黃抗體為主的治療性藥物對(duì)發(fā)病禽群進(jìn)行緊急干預(yù)治療，將經(jīng)濟(jì)損失控制在最小程度。因此，研制具有高效價(jià)、高中和活性的鴿新城疫高免卵黃抗體已成為當(dāng)務(wù)之急，這對(duì)保障養(yǎng)禽業(yè)的持續(xù)健康發(fā)展具有重要現(xiàn)實(shí)意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種鴿新城疫高免卵黃抗體及其制備方法和應(yīng)用，采用鴿源基因VI型新城疫病毒rVI-HZ株制備鴿新城疫滅活疫苗，免疫蛋雞后收集雞蛋，采用聚乙二醇(PEG)法純化卵黃抗體，獲得鴿新城疫病毒高免卵黃抗體，具有高效價(jià)、高中和活性的特點(diǎn)。

本發(fā)明為解決技術(shù)問(wèn)題所采用的技術(shù)方案如下：

本發(fā)明的鴿新城疫高免卵黃抗體，由鴿源基因VI型新城疫病毒rVI-HZ株制備。

作為優(yōu)選的實(shí)施方式，所述鴿源基因VI型新城疫病毒rVI-HZ株于2020年12月10日保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏號(hào)為：CCTCC NO：V202083。

本發(fā)明的鴿新城疫高免卵黃抗體的制備方法，包括以下步驟：

步驟一、鴿新城疫病毒滅活抗原的制備；

步驟二、鴿新城疫滅活疫苗的制備；

步驟三、鴿新城疫卵黃抗體的制備。

作為優(yōu)選的實(shí)施方式，步驟一的具體流程如下：