[發明專利]增強活性的NK免疫細胞在制備治療癌癥的藥物中的用途

在審

• 申請號: 202110376241.6
• 申請日: 2021-04-08
• 公開（公告）號: CN113073079A
• 公開（公告）日: 2021-07-06
• 發明（設計）人: 劉歡;朱小明
• 申請（專利權）人: 北京廣未生物科技有限公司
• 主分類號: C12N5/0783
• 分類號: C12N5/0783;A61K35/17;A61K39/395;A61P35/00
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本發明涉及增強活性的NK免疫細胞在制備治療癌癥的藥物中的用途。本發明證實了特定多肽可以有效提高NK細胞對腫瘤細胞的殺傷力。將多肽用于NK細胞體外培養，獲得殺傷力更強的NK細胞，將所述培養后的NK細胞與PD?L1抗體一起，能夠有效的用于肝癌的治療，具有較好的應用價值和應用價值。

技術領域

本發明涉及生物領域，更具體的涉及增強活性的NK免疫細胞在制備治療癌癥的藥物中的用途。

背景技術

近年來，腫瘤的免疫治療因其對于常規療法無效的晚期腫瘤具有顯著療效而受到極大關注。目前，主要的免疫細胞治療包括T細胞治療和NK細胞的治療。

T細胞是認為能夠特異性殺傷腫瘤細胞的細胞。DC將抗原提呈給T細胞，誘導T細胞活化和增殖，包括CD4輔助性T細胞和CD8殺傷性T細胞。腫瘤抗原特異性T細胞一直是腫瘤治療的重要目標。目前來看，正在進行的針對T細胞的腫瘤免疫治療，可以分為兩大類，一類是T細胞過繼療法，主要包括從患者TIL中擴增腫瘤特異性T細胞進行回輸；另一類是通過基因修飾的方法，在正常T細胞表面表達能夠識別腫瘤抗原的受體，包括T細胞受體(TCR)基因修飾T細胞和嵌合抗原受體(CAR)修飾T細胞(CAR-T)。

NK細胞因其不需預先致敏就可以殺死病毒感染的細胞或者腫瘤細胞而得名。除此之外，NK細胞還可以產生多種細胞因子調節免疫應答，因此，NK細胞是固有免疫系統中非常重要的一群細胞。NK細胞的功能執行主要通過兩大類細胞表面受體，包括殺傷細胞活化受體(KAR)和殺傷細胞抑制受體(KIR)進行調控。正常情況下，KIR與MHCI類分子結合，產生抑制性信號，盡管自身細胞上多糖類抗原與KAR結合產生活化性信號，但由于抑制性占主導地位，從而保證了自身細胞不被NK殺傷。但是，當細胞表面MHCI類分子的表達降低或者缺失，抑制性信號功能減弱，NK則被活化，殺傷相應的細胞。活化后的NK細胞通過釋放穿孔素和顆粒酶等細胞毒性顆粒，或者表達Fas和TRAIL誘導靶細胞發生凋亡。

在對NK細胞的分子特征和功能調控深入研究的基礎上，開發以NK細胞為基礎的免疫治療可能引發腫瘤免疫治療的新的突破。雖然早期的IL-2活化的淋巴因子激活的殺傷細胞(LAK)治療腫瘤效應不佳，但NK細胞的抗腫瘤效應在2002年獲得確認。接受同種異體骨髓回輸的急性粒細胞白血病患者，由于KIR和HLA-C不匹配，復發率明顯降低，表明供體來源的NK細胞介導了針對AML的同種異體抗原的反應而沒有導致移植物抗宿主反應。根據這一策略，向AML患者過繼回輸體外活化的同種異體KIR不匹配NK細胞，或者向惡性神經膠質瘤患者回輸體外活化自體NK細胞獲得了一定的治療效果。但目前看來，過繼回輸NK細胞若想獲得更好的療效，還需要解決NK細胞抑制性受體的效應并清除Treg等一系列問題。為了解決NK細胞抑制性受體的效應，研究者們進行了深入的研究。體外實驗表明，使用IPH2102單抗阻斷KIR2DL1、KIR2DL2和KIR2DL3，可以增加NK細胞的抗腫瘤活性。近期的研究表明，某些情況下，活化的NK細胞也表達PD-1和CTLA4。一項研究表明，在MM患者體內，NK細胞表達PD-1，而且，應用PD-1單抗可以恢復NK細胞的抗腫瘤效應；此外，應用PD-L1的IgG1單抗還可能激發NK細胞的ADCC效應。由于近期靶向PD-1和PD-L1的多個抗體獲得批準，因此，進一步深入研究PD-L1單抗和NK細胞對腫瘤的治療功能具有重要的意義。

肝細胞癌(HCC)占原發性肝癌的70％～80％，世界范圍內是第6位常見的癌癥，術后的復發以及轉移引起的死亡排名第3。肝癌發生時，細胞外基質微環境的改變、HSC分泌的TGF-β等可以抑制NK細胞活性及功能，進而使其對肝細胞的監視功能減弱。由于HCC發病率高，死亡率高，治療及預后差，亟需新的治療方法來解決這些難題，近年來肝癌的免疫治療(如阻斷激活T細胞上的免疫抑制受體PD-1/PD-L1等)成為研究的熱點。但是目前，針對PD-L1抗體種類還不夠豐富，將其與NK細胞一起用于肝癌的治療研究也不多。

發明內容

本發明克服現有技術的缺陷，提供多肽體外培養NK細胞提高其殺傷力的用途。

本發明目的通過下面的技術方案實現：