[發(fā)明專利]一種可視化的鑒別絲羽烏骨雞和黑鳳雞屠體的引物、試劑盒及檢測方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110374733.1
• 申請(qǐng)日: 2021-04-08
• 公開（公告）號(hào): CN112941206B
• 公開（公告）日: 2022-11-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 許繼國;熊信威;周敏;朱學(xué)農(nóng);崔芳芳;馬荊鄂;譚玉文;許橋;貢繼尚;楊艷北;李袁飛;盛文濤;饒友生;王樟鳳
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 南昌師范學(xué)院
• 主分類號(hào): C12Q1/6888
• 分類號(hào): C12Q1/6888;C12Q1/686;C12N15/11
• 代理公司: 北京東方盛凡知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11562
• 代理人: 張雪

1.一種可視化的鑒別絲羽烏骨雞和黑鳳雞屠體的引物，其特征在于，包括：

FIP：核苷酸序列如SEQ ID No.1所示；

BIP：核苷酸序列如SEQ ID No.2所示；

F3：核苷酸序列如SEQ ID No.3所示；

B3：核苷酸序列如SEQ ID No.4所示。

2.包含權(quán)利要求1所述的引物的試劑盒。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的試劑盒，其特征在于，還包括：熒光目視檢測試劑。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的試劑盒，其特征在于，所述熒光目視檢測試劑為羥基萘酚藍(lán)。

5.一種權(quán)利要求1所述的引物或權(quán)利要求2-4任一項(xiàng)所述的試劑盒在鑒別絲羽烏骨雞和黑鳳雞屠體中的應(yīng)用。

6.一種權(quán)利要求1所述的引物或權(quán)利要求2-4任一項(xiàng)所述的試劑盒在鑒別絲羽烏骨雞中的應(yīng)用。

7.一種用于鑒別絲羽烏骨雞和黑鳳雞屠體的鑒別方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）提取待測雞種的基因組DNA；

（2）采用權(quán)利要求1所述的引物對(duì)所述基因組DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，并在所述PCR擴(kuò)增體系中加入熒光目視檢測試劑；所述熒光目視檢測試劑為羥基萘酚藍(lán)；

（3）恒溫?cái)U(kuò)增；

（4）觀察PCR擴(kuò)增體系的顏色，自然光下，顏色為天藍(lán)色，則判定為絲羽烏骨雞，顏色為淡紫色，則判定為黑鳳雞。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的鑒別方法，其特征在于，所述恒溫?cái)U(kuò)增的溫度為64℃，時(shí)間為60min。

9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的鑒別方法，其特征在于，所述PCR擴(kuò)增體系為：2×反應(yīng)緩沖液12.5μL，F(xiàn)IP 1μL，BIP 1μL，F(xiàn)3 1μL，B3 1μL，熒光目視檢測試劑 1μL，BstDNA聚合酶 1μL，模板DNA 2μL，去離子水補(bǔ)充至25μL。