[發明專利]乙二胺四乙酸二鈉的微生物限度檢查方法

在審

• 申請號: 202110371562.7
• 申請日: 2021-04-07
• 公開（公告）號: CN113046410A
• 公開（公告）日: 2021-06-29
• 發明（設計）人: 劉佳;孫覃
• 申請（專利權）人: 費森尤斯卡比華瑞制藥有限公司
• 主分類號: C12Q1/22
• 分類號: C12Q1/22
• 代理公司: 無錫市大為專利商標事務所(普通合伙) 32104
• 代理人: 曹祖良;涂三民

1.一種乙二胺四乙酸二鈉的微生物限度檢查方法，其特征是該檢查方法包括以下步驟：

步驟一、準確稱取乙二胺四乙酸二鈉，加入0.1%(g/g)~1%(g/g)無菌氯化鈣溶液中，在35~45℃下加熱10~60分鐘，充分混勻至完全溶解，制成所需稀釋級的供試液；

步驟二、準確量取適宜稀釋級的供試液至無菌過濾器內，過濾器的數量取決于期望獲得用于需氧菌總數計數以及霉菌和酵母菌總數計數的樣品數量，開啟真空泵和閥門進行過濾；過濾完畢，用無抑菌性的淋洗液淋洗濾膜；過濾完畢，關閉閥門和真空泵，打開無菌過濾器的濾缸，用無菌鑷子將濾膜菌面朝上貼于TSA培養基與SDA培養基表面，一個培養基平皿內只放入一張濾膜，TSA培養基用于需氧菌總數計數，SDA培養基用于霉菌和酵母菌總數計數；

步驟三、將TSA培養基置于30~35℃、SDA培養基置于20~25℃，均倒置培養3~7天，定時觀察菌落生長情況，點計濾膜上生長的所有菌落數，取計數結果最高的菌落數平均值作為最終結果。

2.如權利要求1所述的乙二胺四乙酸二鈉的微生物限度檢查方法，其特征是：步驟一中，無菌氯化鈣的濃度為0.3%(g/g)。

3.如權利要求1所述的乙二胺四乙酸二鈉的微生物限度檢查方法，其特征是：步驟一中，加熱溫度控制在40~44℃，加熱時間控制在45分鐘。

4.如權利要求1所述的乙二胺四乙酸二鈉的微生物限度檢查方法，其特征是：步驟一中，稀釋度控制在1:10。

5.如權利要求1所述的乙二胺四乙酸二鈉的微生物限度檢查方法，其特征是：步驟二中，所述淋洗液為pH7.0的無菌NaCl-蛋白胨緩沖液、0.1%（g/g）無菌蛋白胨水溶液或者pH7.2磷酸鹽緩沖液。

6.如權利要求1所述的乙二胺四乙酸二鈉的微生物限度檢查方法，其特征是：步驟三中，將TSA培養基置于30~35℃下培養5天，將SDA培養基置于20~25℃下培養5天。