[發明專利]一種用于鑒別絲羽烏骨雞與黑鳳雞屠體的引物、試劑盒及應用有效
| 申請號： | 202110371438.0 | 申請日： | 2021-04-07 |
| 公開（公告）號： | CN112831577B | 公開（公告）日： | 2022-11-08 |
| 發明（設計）人： | 許繼國;馬荊鄂;周敏;熊信威;崔芳芳;朱學農;譚玉文;許橋;楊艷北;貢繼尚;李袁飛;盛文濤;饒友生;王樟鳳 | 申請（專利權）人： | 南昌師范學院 |
| 主分類號： | C12Q1/6888 | 分類號： | C12Q1/6888;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京東方盛凡知識產權代理有限公司 11562 | 代理人： | 張雪 |
| 地址： | 330032 江西*** | 國省代碼： | 江西;36 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 用于 鑒別 烏骨雞 黑鳳雞屠體 引物 試劑盒 應用 | ||
1.一種用于鑒別絲羽烏骨雞與黑鳳雞屠體的引物，其特征在于，包括：
上游引物F：核苷酸序列如SEQ ID No.1所示；
上游引物MF：核苷酸序列如SEQ ID No.2所示；
下游引物R：核苷酸序列如SEQ ID No.3所示。
2.包含權利要求1所述的引物的試劑盒。
3.一種權利要求1所述的引物或權利要求2所述的試劑盒在鑒別絲羽烏骨雞和黑鳳雞屠體中的應用。
4.一種權利要求1所述的引物或權利要求2所述的試劑盒在鑒別絲羽烏骨雞中的應用。
5.一種權利要求1所述的引物或權利要求2所述的試劑盒在鑒別黑鳳雞中的應用。
6.一種用于鑒別絲羽烏骨雞和黑鳳雞屠體的鑒別方法，其特征在于，包括以下步驟：
(1)提取待測雞種的基因組DNA；
(2)采用權利要求1所述的引物對所述基因組DNA進行PCR擴增；
(3)對步驟(2)所得PCR產物進行凝膠電泳分析，根據條帶長短進行判定，較長條帶，判定為黑鳳雞，較短條帶，判定為絲羽烏骨雞；
其中，所述較長條帶的長度為542bp，所述較短條帶的長度為310bp。
7.根據權利要求6所述的鑒別方法，其特征在于，所述較長條帶的核苷酸序列如SEQ IDNo.4所示，所述較短條帶的核苷酸序列如SEQ ID No.5所示。
8.根據權利要求6所述的鑒別方法，其特征在于，所述PCR擴增的擴增體系為：2×EcoTaq PCR SuperMix 10μL，引物各0.2L，模板DNA 2μL，去離子水補充至體系20μL。
9.根據權利要求6所述的鑒別方法，其特征在于，所述PCR擴增的擴增程序為：94℃5min，93℃30s、58℃30s、72℃30s，35個循環，72℃5min。
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