[發(fā)明專利]一株具備跨種裂解能力的溶藻弧菌噬菌體、其噬菌體組合物及其應(yīng)用

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110364774.2
• 申請(qǐng)日: 2021-04-02
• 公開（公告）號(hào): CN113201505A
• 公開（公告）日: 2021-08-03
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 潘強(qiáng);任慧英;孫虎芝;徐帆;閆艷新
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 青島諾安百特生物技術(shù)有限公司
• 主分類號(hào): C12N7/00
• 分類號(hào): C12N7/00;A61K35/76;A61P31/04;A23K50/80;A23K10/18;A01N63/40;A01P1/00;C12Q1/70;C12Q1/04;C12R1/92;C12R1/63
• 代理公司: 北京市誠(chéng)輝律師事務(wù)所 11430
• 代理人: 范盈;李玉娜

本發(fā)明公開了一株具備跨種裂解能力的溶藻弧菌噬菌體、其噬菌體組合物及其應(yīng)用，該噬菌體被命名為vB_ValP_PJ115，于2020年11月09日保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物學(xué)中心，其保藏編號(hào)為CGMCC No.20719。該噬菌體不僅具有寬裂解譜，特異性強(qiáng)，可有效防控水產(chǎn)養(yǎng)殖場(chǎng)溶藻弧菌、哈維氏弧菌或坎貝氏弧菌，極大地降低由于溶藻弧菌、哈維氏弧菌或坎貝氏弧菌引起的各種疾病的病發(fā)概率；還可廣泛用于水產(chǎn)養(yǎng)殖過程中的容易因溶藻弧菌、哈維氏弧菌或坎貝氏弧菌感染造成損失的各個(gè)環(huán)節(jié)、養(yǎng)殖環(huán)境的日常消毒、以及水產(chǎn)生鮮食品的抑菌等方面，有益于水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及微生物技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一株具備跨種裂解能力的溶藻弧菌噬菌體及包含該噬菌體的組合物及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

水產(chǎn)養(yǎng)殖過程中常見的致病菌包括溶藻弧菌(Vibrio Alginolyticus)、哈維氏弧菌(Vibrio Harveyi)、坎貝氏弧菌(Vibrio Cambellii)和副溶血弧菌(VibrioParahaemolyticus)。溶藻弧菌、哈維氏弧菌、坎貝氏弧菌和副溶血弧菌都屬于弧菌科(Vibrionaceae)，弧菌屬(Vibrio)，革蘭氏陰性短桿菌。

溶藻弧菌屬于條件性致病菌，可通過受損的皮膚和口腔感染多種海水養(yǎng)殖魚類、蝦類和貝類，引起魚類潰瘍病、腹水癥、蝦紅體病或出血病等消化道疾病的發(fā)生與流行，溶藻弧菌還可引起人類食源性疾病，造成典型的胃腸炎反應(yīng)。

哈維氏弧菌是養(yǎng)殖對(duì)蝦最主要的病原菌之一，對(duì)蝦感染后一般會(huì)出現(xiàn)紅腿、肌肉白濁等癥狀，苗期和動(dòng)物幼體常被感染，同時(shí)也會(huì)造成鱸魚、遮目魚、大菱鲆等魚類的角膜透明、充血，腸胃炎，肌肉潰爛，鰭條基部、肛門紅腫等弧菌病。

噬菌體(Bacteriophage或Phage)是感染細(xì)菌、真菌、放線菌或螺旋體等微生物病毒的總稱，其體積微小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，不具備細(xì)胞結(jié)構(gòu)，分布十分廣泛，凡是細(xì)菌存在之處幾乎都有相應(yīng)的噬菌體。專一性強(qiáng)，噬菌體只針對(duì)其特定的細(xì)菌病原菌作為宿主，不會(huì)破壞正常菌群；無殘留、無毒害，噬菌體具有宿主依賴性，隨宿主的清除而消亡，不會(huì)殘留在動(dòng)物體內(nèi)，而且噬菌體的降解終產(chǎn)物為氨基酸和核苷酸對(duì)人和動(dòng)物無影響。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)上述問題，本發(fā)明提供了一株具備跨種裂解能力的溶藻弧菌噬菌體vB_ValP_PJ115及其應(yīng)用；該噬菌體不僅可用于制備成藥物用于預(yù)防和治療因溶藻弧菌、哈維氏弧菌或坎貝氏弧菌感染導(dǎo)致的疾病，還可用于制備水產(chǎn)飼料添加劑、以及水體消毒劑等。該噬菌體及其噬菌體組合物使用安全、無副作用，用以解決因溶藻弧菌、哈維氏弧菌或坎貝氏弧菌造成的感染、以及與水體中因上述病原菌大量增殖引起的水體問題，避免了因使用抗生素造成的抗生素殘留、以及誘發(fā)耐藥性溶藻弧菌、哈維氏弧菌或坎貝氏弧菌的問題。

本發(fā)明的技術(shù)方案具體如下：

第一方面，本發(fā)明提供了一株溶藻弧菌噬菌體vB_ValP_PJ115，該噬菌體分離自山東省青島市某灣區(qū)污水，已于2020年11月09日被保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏號(hào)為CGMCC No.20719。

電鏡下觀測(cè)到：該噬菌體頭部長(zhǎng)為78-80nm，頭寬為73-75nm，尾長(zhǎng)約25nm，根據(jù)國(guó)際病毒分類委員會(huì)(The International Committee on Taxonomy of Viruses，ICTV)第九次報(bào)告的分類標(biāo)準(zhǔn)鑒定，可確定該噬菌體屬于短尾噬菌體科，將其命名為vB_ValP_PJ115。

第二方面，本申請(qǐng)還提供了上述溶藻弧菌噬菌體在制備用于預(yù)防或治療因溶藻弧菌、哈維氏弧菌或坎貝氏弧菌感染導(dǎo)致疾病的藥物中的應(yīng)用。優(yōu)選的，上述溶藻弧菌、哈維氏弧菌或坎貝氏弧菌感染的疾病包括由溶藻弧菌、哈維氏弧菌或坎貝氏弧菌感染引發(fā)的水產(chǎn)的疾病。

優(yōu)選地，所述水產(chǎn)選自海水水產(chǎn)，更優(yōu)選為海水產(chǎn)的魚類、蝦類、蟹類、螺類或貝類的至少一種。