[發(fā)明專利]一種豬流行性腹瀉病毒S1D片段蛋白的編碼基因及其應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110363023.9
• 申請日: 2021-04-02
• 公開（公告）號: CN113337525A
• 公開（公告）日: 2021-09-03
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 郭霄峰;李潔森;莫煒鈺;鄺燕齊;莫梅君
• 申請（專利權(quán)）人: 華南農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號: C12N15/50
• 分類號: C12N15/50;C12N15/70;C12N1/21;C07K14/165;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/30;C07K16/10;G01N33/569;C12R1/19
• 代理公司: 廣州粵高專利商標(biāo)代理有限公司 44102
• 代理人: 段卉

1.一種豬流行性腹瀉病毒S1D片段蛋白的編碼基因，其特征在于，其核苷酸序列如SEQID NO:1所示。

2.一種重組載體，其特征在于，所述重組載體為連接有權(quán)利要求1所述的編碼基因的載體。

3.一種工程菌，其特征在于，含有權(quán)利要求2所述的重組載體的菌株。

4.一種大量表達(dá)豬流行性腹瀉病毒S1D片段蛋白的制備方法，其特征在于，利用含有攜帶權(quán)利要求1所述的編碼基因的重組質(zhì)粒的工程菌進行誘導(dǎo)表達(dá)；取菌體、破碎菌體，固液分離取沉淀，得到包涵體粗品；洗滌包涵體粗品、溶解、透析復(fù)性，即得。

5.根據(jù)權(quán)利4所述的制備方法，其特征在于，當(dāng)菌液OD₆₀₀值至0.6～1.0時，添加終濃度為0.1～1.5mmol/L的IPTG，16～42℃，誘導(dǎo)表達(dá)2～6小時。

6.根據(jù)權(quán)利4所述的制備方法，其特征在于，依次使用包涵體洗滌液和Tris-HCl洗滌包涵體粗品，其中包涵體洗滌液含有Tris－HCl、NaCl，尿素、和Triton X-100；使用包涵體變性溶解液溶解，其中包涵體變性溶解液含有Tris－HCl、NaCl、尿素、Triton X-100、和DTT。

7.根據(jù)權(quán)利4所述的制備方法，其特征在于，依次使用含有濃度遞減的尿素TGE緩沖液透析。

8.權(quán)利要求1所述的編碼基因、權(quán)利要求2所述的重組載體和/或權(quán)利要求3所述的工程菌在制備豬流行性腹瀉病毒S1D片段蛋白的應(yīng)用。

9.權(quán)利要求4到7任一所述的制備方法制備得到的豬流行性腹瀉病毒S1D片段蛋白。

10.權(quán)利要求9所述的豬流行性腹瀉病毒S1D片段蛋白在制備豬流行性腹瀉病毒檢測試劑盒和/或抗豬流行性腹瀉病毒抗體中的應(yīng)用。