[發(fā)明專利]一種硫酸軟骨素化ES2肽聯(lián)合紫杉醇的結(jié)合物及其制備方法與應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110362870.3
• 申請日: 2021-04-02
• 公開（公告）號: CN113069553B
• 公開（公告）日: 2022-11-08
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 譚海寧;孫鳳;侯慧文;唐雯;王潔;李妍;盧魯;符家愛
• 申請（專利權(quán)）人: 山東大學(xué)
• 主分類號: A61K47/61
• 分類號: A61K47/61;A61K38/39;A61K31/337;A61P35/00;A61P3/10;A61P9/10;A61P27/02;A61P19/02;C07K14/78
• 代理公司: 濟(jì)南圣達(dá)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 37221
• 代理人: 宋海海

本發(fā)明提供一種硫酸軟骨素化ES2肽結(jié)合物及其制備方法和應(yīng)用，屬于生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明通過控制CYS、ES2肽和PTX的供給量，反應(yīng)體系的pH，反應(yīng)時間等條件，制備得到具有不同結(jié)合度的硫酸軟骨素～胱胺?ES2肽結(jié)合物和/或紫杉醇?硫酸軟骨素～胱胺?ES2肽結(jié)合物。本發(fā)明的硫酸軟骨素化ES2肽聯(lián)合胱胺和紫杉醇的結(jié)合物與ES2肽相比，保留了ES2肽的抗血管生成和抗腫瘤活性，并整合了PTX的抗腫瘤作用，使得合成的結(jié)合物具有更高的穩(wěn)定性、靶向性和生物活性，從而具有更好的使用效果和應(yīng)用價值。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種硫酸軟骨素化ES2肽聯(lián)合紫杉醇的結(jié)合物及其制備方法與應(yīng)用。

背景技術(shù)

公開該背景技術(shù)部分的信息僅僅旨在增加對本發(fā)明的總體背景的理解，而不必然被視為承認(rèn)或以任何形式暗示該信息構(gòu)成已經(jīng)成為本領(lǐng)域一般技術(shù)人員所公知的現(xiàn)有技術(shù)。

內(nèi)皮抑素(Endostatin，ES)是目前最有效的內(nèi)源性血管生成抑制劑之一，它是XVIII型膠束的C端蛋白水解片段，能夠有效抑制腫瘤周圍的血管新生，從而抑制腫瘤的形成和轉(zhuǎn)移，已被SFDA批準(zhǔn)用于臨床治療。目前認(rèn)為ES能夠通過多種途徑來影響血管生成的多個過程來達(dá)到抑制腫瘤血管形成的目的，以阻斷腫瘤的營養(yǎng)供給。ES2(IVRRADRAAVP，SEQID NO.1)是ES中的一段由11個氨基酸組成的多肽序列，包含ES中的氨基酸60-70序列和三個表面暴露的精氨酸殘基Arg⁶²，Arg⁶³和Arg⁶⁶。ES2肽具有抑制內(nèi)皮細(xì)胞增殖和遷移的生物活性，其對血管生成的抑制能力要明顯優(yōu)于ES，因此，ES2在腫瘤、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、糖尿病眼部疾病等與新血管生成有密切聯(lián)系的疾病的治療中具有重要作用。但ES2肽也具有一些多肽類藥物普遍具有的缺點，如半衰期短、穩(wěn)定性差等，這嚴(yán)重阻礙了其在臨床中的應(yīng)用。

綜上，現(xiàn)有的多肽類新生血管抑制劑多存在體內(nèi)半衰期短、穩(wěn)定性差、靶向性低等問題，限制了多肽類藥物在制備血管生成抑制劑中的應(yīng)用。因此，本領(lǐng)域迫切需要開發(fā)一種新型的多肽類血管生成抑制劑。

發(fā)明內(nèi)容

針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供一種硫酸軟骨素化ES2肽聯(lián)合紫杉醇的結(jié)合物及其制備方法與應(yīng)用。本發(fā)明成功制備得到具有不同結(jié)合度的硫酸軟骨素～胱胺-ES2肽結(jié)合物和/或紫杉醇-硫酸軟骨素～胱胺-ES2肽結(jié)合物，其同時具有良好的穩(wěn)定性和生物活性。

為實現(xiàn)上述技術(shù)目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：

本發(fā)明的第一個方面，提供一種硫酸軟骨素化ES2肽結(jié)合物，，其由胱胺中的氨基通過酰胺化反應(yīng)與硫酸軟骨素中的羧基相連后，ES2肽的羧基再次通過酰胺化反應(yīng)與胱胺中游離的氨基結(jié)合而成，其結(jié)構(gòu)式如下：

CS-CYS-(ES2)n；

式中，n＝30～60；ES2的分子量為1223Da，CS的分子量為30kDa。

本發(fā)明中的硫酸軟骨素化ES2肽聯(lián)合胱胺結(jié)合物與ES2肽相比，增強了ES2肽的抗血管生成和抗腫瘤活性，整合了大分子硫酸軟骨素在腫瘤組織中的靶向性，使得獲得的結(jié)合物生物活性更強，靶向性更高，穩(wěn)定性更強，因而表現(xiàn)出了較好的應(yīng)用潛力。

進(jìn)一步的，所述硫酸軟骨素化ES2肽結(jié)合物還修飾有紫杉醇，具體的，其由胱胺上的氨基通過酰胺鍵與硫酸軟骨素上的羧基連接，紫杉醇的羥基通過酯鍵與硫酸軟骨素上的羧基相連以及ES2肽的羧基通過酰胺鍵與胱胺上的游離氨基連接形成，結(jié)構(gòu)式如下：

(PTX)n₁-CS-CYS-(ES2)n₂；

式中，n₁＝1～13，n₂＝30～50，ES2的分子量為1223Da，等電點為10.42，硫酸軟骨素的分子量為30kDa。