[發明專利]一種乳腺癌相關基因PIK3CA-Q928H突變體及其特異性引物

在審

• 申請號: 202110361334.1
• 申請日: 2021-04-02
• 公開（公告）號: CN112941187A
• 公開（公告）日: 2021-06-11
• 發明（設計）人: 顧娟;王玥蘋;周道平;吳懷國;唐海林;鄭國沛
• 申請（專利權）人: 無錫市第五人民醫院
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12N15/11;C12N15/54
• 代理公司: 無錫松禾知識產權代理事務所(普通合伙) 32316
• 代理人: 朱亮淞

本發明公開了一種乳腺癌相關基因PIK3CA?Q928H突變體及其特異性引物，屬于分子生物學技術領域，公開了一種乳腺癌PIK3CA基因g.179230121AC位點突變及其應用。該PIK3CA基因突變與PIK3CA正常基因序列相比具有g.179230121AC位點突變。本發明提供了乳腺癌相關基因新的突變位點，可用于早期乳腺癌篩查。

技術領域

本發明屬于分子生物學技術領域，特別涉及一種乳腺癌相關基因PIK3CA-Q928H突變體及其特異性引物。

背景技術

乳腺癌是全世界婦女目前面臨的最為常見的惡性腫瘤，也是引起女性死亡的重要病因。自90年代以來，中國的乳腺癌發病率增長速度是全球的2倍多，每年中國乳腺癌新發數量和死亡數量分別占全世界的12.2％和9.6％。目前，乳腺癌是中國女性發病率最高的癌癥，癌癥死亡原因位居第六，且年輕化趨勢顯著。雖然早期檢查及診斷技術的提高，手術及綜合輔助治療的進步，使得患者的預后有較明顯改善，但是總生存率并不理想。對于特定的分子亞型，由于對藥物的原發或繼發耐藥、甚至缺乏特定的治療靶點，使得部分中晚期病人缺乏有效的治療手段。因此，尋找發生有效的腫瘤標志物對于提高乳腺癌的診斷和預測發生、發展及改善預后具有重要的臨床指導意義。

腫瘤標志物可以有效地作為臨床診斷依據，早期診斷、指導治療、判斷治療療效、檢測復發及轉移，是腫瘤患者的重要檢查指標。乳腺癌是一種全身性疾病、其發生和發展是一個涉及多因素、多環節的復雜過程，包括癌基因的激活以及抑癌基因的失活等。因此，基因突變在乳腺癌的發生、發展過程中起著非常重要的作用。PIK3CA基因是近年來被發現除p53突變和Her-2擴增之外最常見和最重要的乳腺癌中的突變基因，突變比率高達40％，其突變可導致多條信號通路在不同水平發生調控異常，從而促進腫瘤細胞的增殖和存活。

磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)是一種可使肌醇環第三位羥基磷酸化的磷脂酰肌醇激酶，具有磷脂酰肌醇激酶和絲氨酸-蘇氨酸蛋白激酶雙重活性，調節細胞增殖、存活、遷移、凋亡和細胞周期等多種生物學功能。PIK3CA基因編碼Ⅰ類PI3K催化亞單位P110α，其定位于3q26.3，包含21個外顯子，編碼1068個氨基酸。現有研究顯示，應用PCR或基因測序的方法檢測組織中PIK3CA基因的突變情況，可提高腫瘤診斷的敏感性；PIK3CA基因突變的腫瘤細胞對PI3K抑制劑更敏感，特異性地針對PIK3CA突變的靶向治療可有效降低惡性腫瘤的發病率和死亡率。盡管PIK3CA突變對乳腺癌的診治及預后的影響還需進一步研究，但從目前已有的研究數據可以看出PIK3CA高頻突變和突變熱點區域的發現對于乳腺癌基因診斷以及靶向治療的選擇具有重要的臨床意義。

發明內容

發明目的：為了克服現有技術中存在的不足，本發明提供一種乳腺癌相關基因PIK3CA-Q928H突變體及其特異性引物，通過研究乳腺癌患者及與其年齡匹配的健康對照外周血DNA中的突變，尋找與乳腺癌相關的高特異性的突變位點，為乳腺癌的篩查和診斷提供支持。

技術方案：為實現上述目的，本發明的技術方案如下：

一種乳腺癌相關基因PIK3CA-Q928H突變體，該突變基因與PIK3CA正常基因序列相比具有g.179230121AC位點突變；所述PIK3CA基因g.179230121AC位點突變是指突變位點在SEQ ID NO:1序列的第312位堿基A突變為C。

一種用于檢測權利要求1所述的PIK3CA-K672N突變體的特異性引物，該特異性引物的上游引物序列如SEQ ID NO:3所示，下游引物序列如SEQ ID NO:4所示，用于檢測PIK3CA基因g.179230121AC位點突變。

有益效果：本發明的該突變位點為本研究首次在中國漢族女性乳腺癌患者中發現，該突變位點在乳腺癌篩查和基因診斷中具有潛在的應用前景。通過突變位點序列的改變進行相關診斷試劑盒的研制和應用，可使得乳腺癌的診斷更加方便易行，為臨床醫生快速準確掌握患者病情，為臨床治療效果評價奠定基礎，并為發現具有潛在治療價值的新型小分子藥物靶標提供幫助。

附圖說明