[發(fā)明專利]抗人程序性死亡受體1抗體及其制備方法和用途

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110361321.4
• 申請(qǐng)日: 2016-12-19
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN112940123B
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-10-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊帆
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 石藥集團(tuán)巨石生物制藥有限公司
• 主分類號(hào): C07K16/28
• 分類號(hào): C07K16/28;C12N15/13;C12P21/02;A61K39/395;A61P37/04
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

本發(fā)明涉及抗人程序性死亡受體1抗體及其制備方法和用途。具體而言，本發(fā)明涉及利用天然抗體庫(kù)篩選平臺(tái)篩選獲得的一株新型抗人程序性死亡受體1抗體，其能夠特異性識(shí)別人PD?1分子，阻斷PD?1/PD?L1以及PD?1/PD?L2相互作用，提高免疫應(yīng)答水平。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及抗人程序性死亡受體1(Human Program Death 1Receptor，hPD-1)抗體及其制備方法和用途。

背景技術(shù)

程序性死亡受體-1(Human Program Death 1Receptor，hPD-1)是一類重要的免疫負(fù)性調(diào)控分子(也稱“免疫檢查點(diǎn)分子”)，屬于CD28家族成員，該家族成員還包括CD28、CTLA4、ICOS和BTLA等。

PD-1是I型跨膜糖蛋白，由細(xì)胞外區(qū)、跨膜區(qū)和胞內(nèi)區(qū)三部分構(gòu)成。它的細(xì)胞膜外部分是一個(gè)免疫球蛋白可變區(qū)(IgV)樣結(jié)構(gòu)域，胞內(nèi)部分N-端含有一個(gè)免疫受體酪氨酸抑制基序(immunoreceptor tyrosine based inhibitory motif，ITIM)，C-端含有一個(gè)免疫受體酪氨酸轉(zhuǎn)換基序(immunoreceptor tyrosine based switch motif，ITSM)，其中ITSM是PD-1分子向胞內(nèi)傳遞抑制信號(hào)的關(guān)鍵基序。與CTLA-4等家族成員以同源二聚體的形式存在于T細(xì)胞表面不同，PD-1以單體的形式表達(dá)于活化的T細(xì)胞、B細(xì)胞和髓樣細(xì)胞等細(xì)胞表面。

PD-1有兩個(gè)配體，即PD-L1(B7-H1，CD274)和PD-L2(B7-DC，CD273)，屬于B7家族的跨膜分子。PD-L1廣泛分布于成熟的巨噬細(xì)胞、B細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞等造血細(xì)胞以及內(nèi)皮細(xì)胞、胰島細(xì)胞、肥大細(xì)胞等非造血細(xì)胞表面，而且在多種腫瘤細(xì)胞表面均高表達(dá)；PD-L2只在巨噬細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞及部分B細(xì)胞亞類等細(xì)胞表面表達(dá)。與經(jīng)典的免疫負(fù)性調(diào)控分子細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原4(CTLA-4)相類似，PD-1通過(guò)與其配體PDL1、PDL2相互作用發(fā)揮免疫負(fù)調(diào)控作用。當(dāng)PD-1與配體相互作用時(shí)，其胞內(nèi)段ITSM發(fā)生磷酸化并且招募相應(yīng)的磷酸化酶SHP-1和SHP-2，導(dǎo)致下游信號(hào)分子去磷酸化從而下調(diào)免疫細(xì)胞應(yīng)答水平。免疫系統(tǒng)的這一負(fù)性調(diào)控機(jī)制是維持機(jī)體免疫耐受的關(guān)鍵分子基礎(chǔ)。然而，大量的研究表明，PD-1等免疫負(fù)性調(diào)控分子過(guò)度表達(dá)及其與受體PD-L1/PD-L2相互作用所誘導(dǎo)的機(jī)體免疫抑制狀態(tài)在癌癥以及HIV、HCV、HBV等慢性感染性疾病發(fā)病過(guò)程中發(fā)揮重要作用。通過(guò)阻斷PD-1/PD-L1相互作用，可以逆轉(zhuǎn)免疫抑制，提高免疫系統(tǒng)殺傷病毒和腫瘤細(xì)胞的能力；同時(shí)阻斷PD-1/PD-L2相互作用，免疫抑制狀態(tài)逆轉(zhuǎn)效果更好。因此，靶向這類負(fù)性調(diào)控分子成為新一代癌癥治療策略，PD1/PDL1通路抑制劑的研究備受關(guān)注。特異性阻斷PD1/PDL1信號(hào)通路的抗體藥物是該領(lǐng)域研究的重點(diǎn)。抗PD1抗體納武單抗(Nivolumab，Opdivo，百時(shí)美施貴寶)和Pembrolizumab(Keytruda，默克)均獲得了FDA突破性藥物資格并獲批上市。其中百時(shí)美施貴寶產(chǎn)品納武單抗于2014年12月獲FDA批準(zhǔn)上市，用于黑色素瘤臨床治療；隨后在2015年3月，F(xiàn)DA批準(zhǔn)該抗體用于治療鱗狀非小細(xì)胞肺癌，標(biāo)志著該類免疫療法正式進(jìn)入實(shí)體瘤臨床治療領(lǐng)域。

本領(lǐng)域依然存在對(duì)特異性阻斷PD1/PDL1信號(hào)通路的抗體藥物的需求。

發(fā)明內(nèi)容