[發明專利]一種乳腺癌易感基因BRCA2-K2305N突變體及其特異性引物

有效

• 申請號: 202110360597.0
• 申請日: 2021-04-02
• 公開（公告）號: CN112941186B
• 公開（公告）日: 2023-06-23
• 發明（設計）人: 王學東;王玥蘋;周道平;鄭國沛;唐海林;顧娟
• 申請（專利權）人: 無錫市第五人民醫院
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12N15/11
• 代理公司: 無錫松禾知識產權代理事務所(普通合伙) 32316
• 代理人: 朱亮淞

本發明公開了一種乳腺癌易感基因BRCA2?K2305N突變體及其特異性引物，屬于分子生物學技術領域。應用PCR?特異性引物技術設計出含有該突變基因發生改變的引物序列，針對特異性的BRCA2基因g.32344631GT突變位點進行PCR擴增檢測。本發明提供了乳腺癌相關基因新的突變位點，可用于早期乳腺癌篩查。

技術領域

本發明屬于分子生物學技術領域，特別涉及一種乳腺癌易感基因BRCA2g.32344631GT位點突變體及其特異性引物。

背景技術

近年來我國癌癥的發病率和死亡率不斷攀升，惡性腫瘤已成為我國重大的公共衛生問題。據我國腫瘤登記中心2016年發布的結果顯示，2012年我國腫瘤新發病例數358.6萬例，死亡例數218.7萬例，粗發病率265/10萬，死亡率161.5/10萬。在惡性腫瘤發病現狀中，乳腺癌在女性惡性腫瘤中處于第一位，每年新發約27.3萬，且發病年齡不斷呈現年輕化趨勢，是嚴重威脅女性生命的第一殺手。

乳腺癌是具有很強遺傳背景的惡性腫瘤，現有研究顯示5-10％的乳腺癌是由遺傳因素導致。目前BRCA1、BRCA2、TP53、PALB2、PTEN、CHEK2、ATM以及RAD0等基因被認定為乳腺癌易感基因，其中BRCA和BRCA2基因為遺傳性乳腺癌的主要易感基因。研究表明，攜帶有BCA1和BRCA2基因致病突變的人群在70歲之前發生乳腺癌的概率分別可達40-80％和20-85％，同時，已被診斷為遺傳性乳腺癌的患者，發生復發轉移的可能性也高于普通人群。

BRCA1和BRCA2屬于抑癌基因，均呈常染色體顯性遺傳，且突變容易引發早年發病。BRCA2基因位于人類染色體13q12，包含27個外顯子，編碼BRCA2蛋白含3418個氨基酸，對細胞生長的調節有重要作用。BRCA2基因發生突變后表達的蛋白質失去了修復DNA損傷的功能，導致染色體不穩定，促進腫瘤發生。男性BRCA2突變攜帶者終生患前列腺癌，乳腺癌，胰腺癌的概率分別為20％、6％和3％，而女性BRCA2突變攜帶者終生患乳腺癌為26％-84％，卵巢癌的概率為20％。BRCA2基因突變相關的腫瘤往往會表達ER(雌激素受體)與PR(孕激素受體)，與散發性乳腺癌表現出相似的特征。現已經報道的BRCA2突變主要是移碼突變，也會發生大量的錯義突變，但錯義突變大多屬于意義未明變異，因此發現BRCA2新的致病突變，對開展遺傳性乳腺癌的分子診斷具有重要意義。

發明內容

發明目的：為了克服現有技術中存在的不足，本發明提供一種乳腺癌易感基因BRCA2g.32344631GT位點突變體及其特異性引物，本發明提供了乳腺癌致病的新的突變位點，可用于早期乳腺癌篩查。

技術方案：為實現上述目的，本發明的技術方案如下：

一種乳腺癌易感基因BRCA2-K2305N突變體，該突變基因與BRCA2正常基因序列相比具有g.32344631GT位點突變；所述BRCA2基因g.32344631GT位點突變是指突變位點在SEQ?ID?NO:1序列的第277位堿基G突變為T。

一種用于檢測權利要求1所述的乳腺癌易感基因BRCA2-K2305N的特異性引物，該特異性引物的上游引物序列如SEQ?ID?NO:3所示，下游引物的序列如SEQ?ID?NO:4所示，用于檢測BRCA2-K2305N基因g.32344631GT位點突變。

有益效果：本發明的該突變位點為本研究首次在中國漢族女性乳腺癌患者中發現，且在正常人群中不存在該突變，數據庫顯示歐美人群該區域的掃描也未發現該突變位點。

本發明通過控制年齡對疾病發展的影響因素，研究突變位點在乳腺癌輔助診斷的應用前景，闡述突變位點對于乳腺癌進展的影響，揭示其診斷價值。因此，本發明獲得了乳腺癌發病相關突變位點譜和特異性標志物。

通過突變位點的檢測，可使得乳腺癌的診斷更加方便易行，為臨床醫生快速準確掌握患者病情，為臨床治療效果評價奠定基礎，并為發現具有潛在治療價值的新型小分子藥物靶標提供幫助。