[發明專利]唾液酸化糖鏈的血清鑒定試劑在制備用于診斷肝臟疾病的試劑中的用途

在審

• 申請號: 202110359035.4
• 申請日: 2021-04-02
• 公開（公告）號: CN113092645A
• 公開（公告）日: 2021-07-09
• 發明（設計）人: 劉宇博;閆智;張嘉寧
• 申請（專利權）人: 大連理工大學
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/72
• 代理公司: 大連理工大學專利中心 21200
• 代理人: 陳玲玉

本發明公開了唾液酸化糖鏈的血清鑒定試劑在制備用于診斷肝臟疾病的試劑中的用途，具體為一組可以診斷乙肝相關肝癌、非乙肝相關肝癌和肝硬化的分子標志物及檢測方法，涉及分子診斷領域。在對血清N?糖末端進行唾液酸特異性衍生化處理，并通過MALDI?TOF質譜分析血清N?糖組成成分后，發現存在一些糖鏈或糖鏈組合，其在血清中的相對強度，在乙肝相關肝癌、非乙肝相關肝癌、肝硬化患者和健康人中，分別存在顯著性差異，因此該種組合方式可作為診斷乙肝相關肝癌、非乙肝相關肝癌和肝硬化的潛在標志物。

技術領域

本發明涉及腫瘤分子診斷技術領域，涉及唾液酸化糖鏈的血清鑒定試劑在制備用于診斷肝臟疾病的試劑中的用途，尤其涉及一組與血清N糖末端唾液酸相關的糖鏈作為乙肝相關肝癌、非乙肝相關肝癌及肝硬化的潛在標志物及其檢測方法。

背景技術

乙型肝炎病毒(HBV)是世界上最常見的慢性感染之一，估計有2.57億慢性感染者，是世界范圍內導致肝癌的主要原因。HBV感染可長期刺激肝臟細胞并形成慢性炎癥，這種慢性炎癥的狀態可以潛移默化的促進肝臟纖維化，促進早期肝細胞癌的發生，進而推動腫瘤的發展、侵襲和轉移。

在世界范圍內，肝癌是導致男性癌癥相關死亡的第二大原因，每年有74.5萬人死亡，是第六大常見癌癥，發病率不斷上升(每年約有80萬新病例)。根據肝癌發病的相關原因，可將肝癌分為乙肝相關肝癌和非乙肝相關肝癌，評判標準為肝癌患者體內是否存在有乙型肝炎病毒感染。肝癌在早期無特殊癥狀出現，因此極難被及時發現，通?；颊叱霈F肝癌相關癥狀在中晚期，而中晚期腫瘤具有很強的侵襲和遷移能力，不利于治療。肝癌的預后和病情的分期關系密切，分期越早，患者的預后越好，生存期越長。對于早期的肝癌，給予根治性手術切除，患者的5年生存率可以達到50％～60％左右。對于中期不能手術切除的肝癌患者，可以選擇介入、消融、放化療以及靶向治療，5年生存率僅有20％左右。如果肝癌發展到晚期，出現全身的擴散，生存期非常短，大約6個月。因此急需尋找新的肝癌腫瘤標志物用于早期診斷肝癌，提高肝癌患者的總體生存率。

蛋白質糖基化修飾是最重要的蛋白質翻譯后修飾之一，蛋白質功能的實現多與糖基化修飾密切相關。糖基化對于蛋白質的折疊、運輸、定位起著重要作用，并參與受體激活、信號轉導等諸多重要的生物進程。研究表明，糖基化修飾改變是腫瘤發生發展的共同特征。特征寡糖結構與特征寡糖連接的糖蛋白和糖脂已經成為重要的腫瘤標志物。目前臨床許多腫瘤血清診斷生物標志物如CA19-9(消化道腫瘤)、CA242、CA72-4和CEA(胃癌、結直腸癌)、AFP(肝癌)、CA15-3和CEA(乳腺癌)、CA12-5和CA72-4(卵巢癌)、SCC和CEA(宮頸癌)等均為腫瘤發生后機體分泌的糖鏈或糖蛋白產物。而且，越來越多的研究人員關注將多糖作為疾病標記物這一研究前沿，基于質譜的對人血清的多糖鑒定已經發現了多個有潛力的癌癥生物標記物。唾液酸是N-糖基化修飾的重要組成部分，唾液酸作為復合糖的組成部分鑲嵌于所有細胞表面以及大多數脊椎動物糖蛋白和糖脂分子的末端最外側,通過α2,3-和α2,6-鍵作為封端殘基。研究表明，特征連接唾液酸表達的顯著上調或下調變化與惡性腫瘤的發生、發展、侵襲、轉移和預后不良等相關，有的作為腫瘤標志物或預后標志物，也可能成為腫瘤免疫治療的靶點。

因此，尋找唾液酸相關的肝癌腫瘤標志物，使其能將乙肝相關肝癌、非乙肝相關肝癌、肝硬化和健康人區分便尤為重要。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是克服現有技術的不足和缺陷，提供唾液酸化糖鏈的血清鑒定試劑在制備用于診斷肝臟疾病的試劑中的用途，具體為一組肝癌腫瘤相關的腫瘤標志物，為肝癌腫瘤的早期診斷提供新的方法。

為了解決上述問題，本發明提出以下技術方案：

唾液酸化糖鏈的血清鑒定試劑在制備用于診斷肝臟疾病的試劑中的用途，其中，所述的唾液酸化糖鏈選自：

α2,6唾液酸化糖鏈Hex5HexNAc3NeuAc1；