[發(fā)明專利]全血PCT免疫比濁試劑

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110357148.0
• 申請(qǐng)日: 2021-04-01
• 公開（公告）號(hào): CN113049837A
• 公開（公告）日: 2021-06-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 孟濤;周淼;范可君
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 捷和泰（北京）生物科技有限公司
• 主分類號(hào): G01N33/74
• 分類號(hào): G01N33/74;G01N33/543
• 代理公司: 北京集智東方知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11578
• 代理人: 陳亞斌;關(guān)兆輝

本發(fā)明公開了一種全血PCT免疫比濁試劑，包括試劑1和試劑2和標(biāo)準(zhǔn)品，所述試劑1包括緩沖液A、阻斷劑、增感劑、防腐劑、表面活性劑、BSA和穩(wěn)定劑，試劑2包括緩沖液B、BSA、穩(wěn)定劑、防腐劑和包被PCT抗體的乳膠微球，標(biāo)準(zhǔn)品為含有不同濃度PCT抗原的小牛血清，其特征在于：所述試劑1中還添加有0.5％?2％的CaCl₂。本發(fā)明在試劑1中添加一定濃度的CaCl₂，可以消除外源性干擾，提高檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，簡(jiǎn)化操作步驟，提高檢測(cè)效率。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種全血PCT免疫比濁試劑，屬于醫(yī)學(xué)免疫領(lǐng)域。

背景技術(shù)

降鈣素原(procalcitonin，PCT)是一種臨床標(biāo)志物，廣泛應(yīng)用于血液腫瘤科、麻醉科、內(nèi)科、移植外科、新生兒科和兒科等診療科室。在正常情況下，PCT以游離形式存在于人體血清中，其水平含量很低，當(dāng)嚴(yán)重細(xì)菌、真菌、寄生蟲感染以及膿毒癥和多臟器功能衰竭時(shí)，PCT在血漿中的水平升高，而自身免疫、過(guò)敏和病毒感染時(shí)，PCT不會(huì)升高，局部有限的細(xì)菌感染、輕微的感染和慢性炎癥也不會(huì)導(dǎo)致其升高。因此PCT可以作為一個(gè)急性參數(shù)來(lái)鑒別診斷細(xì)菌性和非細(xì)菌性感染和炎癥；監(jiān)測(cè)有感染危險(xiǎn)的患者(如外科術(shù)后和器官移植后免疫抑制期，多處創(chuàng)傷)以及需要重癥監(jiān)護(hù)患者，用來(lái)探測(cè)細(xì)菌感染的全身影響或檢測(cè)膿毒性并發(fā)癥；評(píng)價(jià)嚴(yán)重炎癥性疾病臨床進(jìn)程及預(yù)后，如腹膜炎、膿毒癥、SIRS和MODS等。

免疫比濁法廣泛用于PCT的測(cè)定。檢測(cè)過(guò)程中由于方法學(xué)、樣本狀態(tài)、試劑組分等因素的影響，往往會(huì)對(duì)診斷結(jié)果產(chǎn)生干擾，導(dǎo)致出現(xiàn)測(cè)試結(jié)果假陰或假陽(yáng)的情況。造成干擾的類型多種多樣，包括內(nèi)源性干擾和外源性干擾。內(nèi)源性干擾包括溶血，黃疸及脂血，此外患者體內(nèi)的異常物質(zhì)如類風(fēng)濕因子也會(huì)造成干擾。外源性干擾包括常見治療藥物，標(biāo)準(zhǔn)處理過(guò)程中的添加物等。

對(duì)于不同干擾，目前采取的方法包括樣本預(yù)處理(溶血、高血脂樣本)，在試劑中添加阻斷劑，或者在試劑開發(fā)階段對(duì)抗體原料進(jìn)行預(yù)處理等手段進(jìn)行消除。

在大規(guī)模的健康體檢篩查和臨床病人檢驗(yàn)時(shí)，需要增加樣本篩選、預(yù)處理等環(huán)節(jié)，增加工作量，不利于快速出具檢驗(yàn)結(jié)果，延長(zhǎng)檢測(cè)時(shí)間，不利于快速診斷。

添加阻斷劑或?qū)贵w原料進(jìn)行預(yù)處理會(huì)增加試劑成本，原料處理過(guò)程會(huì)對(duì)抗原抗體的結(jié)構(gòu)產(chǎn)生影響進(jìn)而影響試劑性能，同時(shí)原料處理過(guò)程也需要較多復(fù)雜的操作過(guò)程對(duì)與生產(chǎn)工藝有較高要求。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種全血PCT免疫比濁試劑，通過(guò)在試劑1中添加一定濃度的CaCl₂，可以消除外源性干擾，從而無(wú)需進(jìn)行樣品預(yù)處理，操作過(guò)程簡(jiǎn)單方便。

為達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為：一種全血PCT免疫比濁試劑，包括試劑1和試劑2，所述試劑1包括緩沖液A、鼠抗人IgM抗體、聚乙二醇6000、Proclin950、TritonX-100、BSA和NaCl，試劑2包括緩沖液B、BSA、NaCl、Proclin950和包被PCT抗體的乳膠微球，其特征在于：所述試劑1中還添加有0.5％-2％的CaCl₂。

優(yōu)選的，所述緩沖液A為pH6.5檸檬酸鹽緩沖液，試劑1中緩沖液A終濃度為0.05mol/L。其中終濃度指最終的反應(yīng)體系中緩沖液的濃度。以下同。

優(yōu)選的，試劑1和試劑2中NaCl終濃度均為1％w/v，其中w/v代表質(zhì)量/體積比，即100ml溶液中含有1gNaCl，以下同。

優(yōu)選的，試劑1中TritonX-100終濃度均為0.15％w/v。

優(yōu)選的，試劑1和試劑2中Proclin950終濃度為0.1％w/v。

優(yōu)選的，試劑1和試劑2中BSA濃度為1％w/v，試劑1中鼠抗人IgM抗體終濃度為0.04％w/v，試劑1中聚乙二醇6000終濃度為1％-2％w/v。