[發明專利]一種豆腐渣固態發酵生產γ-聚谷氨酸的方法

在審

• 申請號: 202110356942.3
• 申請日: 2021-04-01
• 公開（公告）號: CN112813114A
• 公開（公告）日: 2021-05-18
• 發明（設計）人: 馬霞;劉芷含;何艷
• 申請（專利權）人: 上海應用技術大學
• 主分類號: C12P13/02
• 分類號: C12P13/02;C12N1/20;C12R1/125
• 代理公司: 上海申匯專利代理有限公司 31001
• 代理人: 徐俊

1.一種豆腐渣固態發酵生產γ-聚谷氨酸的方法，其特征在于，包括如下步驟：

步驟1：枯草芽孢桿菌進行復蘇、活化培養，得到枯草芽孢桿菌種子液；

步驟2：配制豆腐渣發酵培養基，接種步驟1得到的枯草芽孢桿菌種子液，進行發酵培養，得到發酵產物；

步驟3：將上述發酵產物分離后提取得到γ-聚谷氨酸。

2.如權利要求1所述的豆腐渣固態發酵生產γ-聚谷氨酸的方法，其特征在于，所述步驟1具體為：將枯草芽孢菌接種至斜面培養基中復蘇培養，得到菌種，再挑取菌種接種到裝有液體培養基的搖瓶中進行活化培養，得到枯草芽孢桿菌發酵種子液。

3.如權利要求2所述的豆腐渣固態發酵生產γ-聚谷氨酸的方法，其特征在于，所述斜面培養基的組成包括：LB培養基40g，瓊脂20g，蒸餾水1L，自然pH；所述液體培養基的組成包括：蔗糖30g，牛肉膏10g，谷氨酸鈉30g，MgSO₄·7H₂O 0.25g，K₂HPO₄ 0.5g,CaCl₂ 1g，蒸餾水1L，自然pH。

4.如權利要求2所述的豆腐渣固態發酵生產γ-聚谷氨酸的方法，其特征在于，所述復蘇培養的條件為：溫度37℃，時間24h；所述活化培養的條件為：液體培養基50mL，搖瓶轉速220r/min，溫度37℃，時間18h。

5.如權利要求1所述的豆腐渣固態發酵生產γ-聚谷氨酸的方法，其特征在于，所述步驟2中的配制豆腐渣發酵培養基具體為：將干豆腐渣與蒸餾水按照質量比為1:2～4的比例混合后得到豆腐渣發酵培養基。

6.如權利要求1所述的豆腐渣固態發酵生產γ-聚谷氨酸的方法，其特征在于，所述步驟2中發酵培養的條件為：接種量2％，溫度37℃，時間24～28h，靜置發酵。

7.如權利要求1所述的豆腐渣固態發酵生產γ-聚谷氨酸的方法，其特征在于，所述步驟3的分離具體為：將發酵產物用質量分數0.9％的生理鹽水浸10min，離心，去除菌體和部分豆粉沉淀后得到上清液；所述的提取具體為：調節分離所得的上清液的pH至3，然后加入4倍體積的異丙醇，放入冰箱沉淀12h后離心，離心所得沉淀物即為γ-聚谷氨酸。

8.如權利要求1～7中任意一項所述的豆腐渣固態發酵生產γ-聚谷氨酸的方法，其特征在于，所述的枯草芽孢桿菌為Bacillus subtilis GIM1.286。