[發(fā)明專利]一種納米硒的制備及其在水稻籽粒降鎘富硒的方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202110354979.2 | 申請日： | 2021-04-01 |
| 公開（公告）號： | CN112921055A | 公開（公告）日： | 2021-06-08 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 韋燕燕;張?jiān)鲈?/a>;顧明華;沈方科;凌毅婷;陳雪 | 申請（專利權(quán)）人： | 廣西大學(xué) |
| 主分類號： | C12P3/00 | 分類號： | C12P3/00;A01G22/22;A01C21/00;C12R1/11 |
| 代理公司： | 濟(jì)南市新圖新夏天專利代理事務(wù)所(普通合伙) 37330 | 代理人： | 陳體芝 |
| 地址： | 530003 廣西壯族*** | 國省代碼： | 廣西;45 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 納米 制備 及其 水稻 籽粒 降鎘富硒 方法 | ||
本發(fā)明涉及納米硒制備及應(yīng)用技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種納米硒的制備及其在水稻籽粒降鎘富硒的方法，該納米硒的制備過程包括以下步驟：S1、搖菌：將活化好的巨大芽孢桿菌菌株分別接種于2.0mM亞硒酸鈉培養(yǎng)液中，連續(xù)搖培46～50小時(shí)，得含有納米硒的培養(yǎng)液；S2、收菌：以8000×g的速度離心8～12min，收集菌體沉淀物；S3、一次離心收集：將含有納米硒的培養(yǎng)液收集于50ml的離心杯中，置于離心機(jī)內(nèi)以12000×g的速度離心12～18min，去除上清，收集杯底菌體與納米硒混合物。本發(fā)明既可以提高納米硒的轉(zhuǎn)化率，又能顯著地降低在水稻種植中籽粒的鎘含量，并提高其籽粒的硒含量。
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及納米硒制備及應(yīng)用技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種納米硒的制備及其在水稻籽粒降鎘富硒的方法。
背景技術(shù)
納米硒具有低毒、生物活性高和環(huán)境友好等特點(diǎn)，有研究發(fā)現(xiàn)納米硒可以一定程度緩解及降低水稻植物中鎘含量，同時(shí)還有研究表明，土壤中的微生物具有還原亞硒酸合成納米硒的能力。因此，依托廣西等地得天獨(dú)厚的富硒土壤資源，篩選可能高效轉(zhuǎn)化納米硒的微生物，明確微生物合成納米硒在重金屬污染土壤上應(yīng)用的重要性。同時(shí)也為生物納米硒對水稻富硒降鎘提供技術(shù)指導(dǎo)，這對農(nóng)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展和人們身體健康具有十分重要的意義。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是為了解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的缺點(diǎn)，而提出的一種納米硒的制備及其在水稻籽粒降鎘富硒的方法。
一種納米硒的制備，包括以下步驟：
S1、搖菌：將活化好的巨大芽孢桿菌菌株分別接種于2.0mM亞硒酸鈉培養(yǎng)液中，連續(xù)搖培46～50小時(shí)，得含有納米硒的培養(yǎng)液；
S2、收菌：以8000×g的速度離心8～12min，收集菌體沉淀物；
S3、一次離心收集：將含有納米硒的培養(yǎng)液收集于50ml的離心杯中，置于離心機(jī)內(nèi)以12000×g的速度離心12～18min，去除上清，收集杯底菌體與納米硒混合物；
S4、清洗：向離心杯中加入無菌超純水對菌體與納米硒混合物進(jìn)行清洗，連續(xù)清洗三遍；
S5、液氮研磨：將收集的菌體與納米硒混合物置于無菌研缽中，加入液氮立即研磨，并收集其研磨漿液；
S6、超聲分散：收集的研磨漿液先用少量無菌水懸浮，再超聲5～7min，之后再加無菌水將其進(jìn)行充分懸浮，保證終體積約為原始培養(yǎng)液體積的1/2，超聲時(shí)間≤10min；
S7、真空抽濾：將納米硒懸液分別用多組濾膜真空抽濾過濾，去除大顆粒雜質(zhì)；
S8、液-液萃?。簩⒊闉V純化后的納米硒懸液轉(zhuǎn)入分液漏斗中，加入1/5～3/5體積的正己烷，充分混合均勻，靜置分層，棄除上層含有菌體的有機(jī)相，重復(fù)操作6～7次，直至上層有機(jī)相透明無色沒有菌體，回收水相；
S9、二次離心收集：以速度10000×g離心8～12min，收集SeNPs沉淀，同時(shí)用無菌超純水洗滌三遍；
S10、儲存：將純化后的SeNPs，用去離子水進(jìn)行稀釋，轉(zhuǎn)移至新的2ml離心管中，于4℃～5℃密封存放，備用。
優(yōu)選的，所述搖菌過程中，搖培的溫度為28℃～32℃，搖培的速度為150～210rpm。
優(yōu)選的，所述超聲分散過程中，超聲的環(huán)境為：在冰敷狀態(tài)下。
優(yōu)選的，所述真空抽濾過程中，濾膜的規(guī)格分別為：20μm、10μm、5μm、3μm、1.2μm以及0.8μm。
優(yōu)選的，所述真空抽濾過程中，20μm和10μm的濾膜需要用酒精預(yù)先浸泡2 min方可使用，且這兩種濾膜放置于石英篩上時(shí)，糙面朝上，光面朝下。
一種納米硒應(yīng)用在水稻籽粒降鎘富硒的方法，包括以下步驟：
S1、水稻種子發(fā)芽前先用去離子水浮選以去掉癟粒，置于30% H2O2中消毒10～20min，洗凈后浸泡在飽和CaSO4溶液中過夜；
該專利技術(shù)資料僅供研究查看技術(shù)是否侵權(quán)等信息，商用須獲得專利權(quán)人授權(quán)。該專利全部權(quán)利屬于廣西大學(xué)，未經(jīng)廣西大學(xué)許可，擅自商用是侵權(quán)行為。如果您想購買此專利、獲得商業(yè)授權(quán)和技術(shù)合作，請聯(lián)系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/202110354979.2/2.html，轉(zhuǎn)載請聲明來源鉆瓜專利網(wǎng)。
