[發明專利]模擬多種HFRS疾病特征的動物模型的構建方法及其用途

有效

• 申請號: 202110354064.1
• 申請日: 2021-04-01
• 公開（公告）號: CN113041267B
• 公開（公告）日: 2022-07-26
• 發明（設計）人: 吳興安;劉蓉蓉;馬瑞雪;劉梓諭;侯詩源;王芳;應旗康;張曉曉
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍空軍軍醫大學
• 主分類號: A01K67/027
• 分類號: A01K67/027;A61K49/00
• 代理公司: 西安銘澤知識產權代理事務所(普通合伙) 61223
• 代理人: 崔瑞迎

本發明涉及一種動物模型的構建方法，特別涉及模擬多種HFRS疾病特征的動物模型的構建方法及用途。所述方法是將HTNV 76?118病毒腹腔注射感染NLRC3KO小鼠，感染劑量為5×10⁵PFUs/50μL/只；所述疾病特征表現為：該模型小鼠腎臟腎小管彌漫性擴張，腎髓質毛細血管出血；脾臟中出現大量髓外造血灶，肝臟中肝細胞水腫、變性、壞死；血小板數量下降，白細胞數量減少，同時伴有肝腎功能損傷。本發明構建的動物模型可用于HFRS疾病藥物的篩選和療效評價。

技術領域

本發明涉及一種動物模型的構建方法，特別涉及模擬多種HFRS疾病特征的動物模型的構建方法及其用途。

背景技術

漢坦病毒(Hantavirus)隸屬于布尼亞病毒目漢坦病毒科的正漢坦病毒屬，是一種有胞膜的單負鏈RNA病毒，其基因組由3個片段組成，其中大(L)片段編碼病毒RNA依賴的RNA聚合酶(RNA-depended RNA polymerase)，中(M)片段編碼病毒包膜糖蛋白(glycoproteins，Gn and Gc)，小(S)片段編碼病毒核蛋白(nucleoprotein,NP)。人類主要通過接觸其自然宿主(嚙齒類動物)的排泄物或直接被咬傷而感染漢坦病毒，主要引起兩種嚴重的疾病，分別為腎綜合征出血熱(hemorrhagic fever with renal syndrome,HFRS)和漢坦病毒心肺綜合征(hantavirus cardiopulmonary syndrome,HPS)。HFRS是一種以發熱、出血、急性腎功能損傷為主要特征的自然疫源性疾病。

HTNV感染其自然宿主并不出現明顯的臨床癥狀，而是處于持續帶毒的狀態這導致目前尚缺乏HTNV感染的疾病動物模型，從而制約了臨床治療藥物以及HTNV疫苗評價體系的建立。理想的病毒性疾病動物模型是研究病毒在宿主體內的入侵、復制、傳播、致病、轉歸等機理，并為臨床治療藥物以及疫苗評價提供重要工具。雖然，50年代就明確新生乳鼠接種HTNV后能夠引起致死性疾病，但其主要引發小鼠神經系統病變，與HFRS疾病特點不一致，因此具有限制性。此外，前期文獻報道的SCID小鼠可作為一種HTNV感染動物的評價體系，是基于病毒感染后小鼠肝、脾、肺中能夠檢測到高水平的病毒特異性抗原，同時肝、脾肺組織中出現了明顯的病理變化，而心、腦、腎組織中均未見明顯的病理學變化但是，該SCID小鼠模型并不能很好的模擬HFRS主要疾病特征：急性腎功能損傷和血小板減少，具有一定的限制性。

發明內容

針對現有技術的不足，本發明提供了一種模擬多種HFRS疾病特征的動物模型的構建方法及用途，該動物模型所誘導產生的病理性改變能夠模擬典型HFRS疾病的臨床特征，更加符合HTNV對人類的自然感染過程。

為了實現上述目標，本發明采用如下的技術方案：

本發明的第一個方面是提供模擬多種HFRS疾病特征的動物模型的構建方法，將HTNV毒注射感染小鼠，感染劑量為4.98×10⁵-5.02×10⁵PFUs/50μL/30g；

所述疾病特征表現為：該模型小鼠腎臟腎小管彌漫性擴張，腎髓質毛細血管出血；脾臟中出現大量髓外造血灶，肝臟中肝細胞水腫、變性、壞死；血小板數量下降，白細胞數量減少，同時伴有肝腎功能損傷。

進一步的，所述注射為腹腔注射。

進一步的，所述小鼠為NLRC3 KO小鼠。

本發明的第二個方面是提供一種非診斷和非治療性的根據所述方法構建的動物模型的用途，該用途具體是用于篩選或鑒定治療或緩解多種HFRS疾病的物質其中，所述HFRS臨床疾病特征表現為：腎臟腎小管彌漫性擴張，腎髓質毛細血管出血；脾臟中出現大量髓外造血灶，肝臟中肝細胞水腫、變性、壞死；血小板數量下降，白細胞數量減少，同時伴有肝腎功能損傷。

本發明的第三個目的是提供一種非診斷和非治療性的，篩選或鑒定治療多種HFRS疾病的潛在治療劑的方法，包括以下步驟：