[發明專利]一種腦膜炎球菌培養基及其配制方法及培養方法

有效

• 申請號: 202110349949.2
• 申請日: 2021-03-31
• 公開（公告）號: CN113025532B
• 公開（公告）日: 2023-01-10
• 發明（設計）人: 鄭吉;葛海兵;方建鵬;李強
• 申請（專利權）人: 艾美衛信生物藥業（浙江）有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/38;C12P19/04;C12R1/36
• 代理公司: 北京維正專利代理有限公司 11508
• 代理人: 魯勇杰

1.一種腦膜炎球菌培養基，其特征在于，其包括A液和B液，且A液和B液的體積比為（8.5-9.5）:(0.5-1.5)；

每升所述A液包括以下配方的組分：5-8g酪蛋白、3-5g酵母浸粉、0.1-0.15g氨基酸營養物、0.15-0.25g KH₂PO₄、0.98-1.0g Na₂HPO₄、0.5-1.0g L-谷氨酸鈉、0.5-1.0g NH₄Cl、2-4gNaCl；所述氨基酸營養物由包括L-胱氨酸和甘氨酸按照1 ：（3-5）的重量比制成；

每升所述B液包括以下配方的組分：0.3-0.4g MgSO₄、0.004-0.006g MnSO₄.H₂O 、9-11g葡萄糖。

2.根據權利要求1所述的用于腦膜炎球菌的培養基，其特征在于，所述A液和所述B液的體積比為9:1。

3.根據權利要求1所述的用于腦膜炎球菌的培養基，其特征在于，每升所述A液包括以下配方的組分：5-7g酪蛋白、3-4g酵母浸粉、0.12-0.125g氨基酸營養物、0.2-0.25g KH₂PO₄、0.99-1.0g Na₂HPO₄、0.75-1.0g NH₄Cl、3-4g NaCl；

每升所述B液包括以下配方的組分：0.3-0.4g MgSO₄、0.004-0.006g MnSO₄.H₂O 、9-11g葡萄糖。

4.根據權利要求1所述的用于腦膜炎球菌的培養基，其特征在于，所述氨基酸營養物由包括L-胱氨酸和甘氨酸按照1 ：4的重量比制成。

5.權利要求1-4任一項所述的腦膜炎球菌培養基的配制方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）按配制量稱取酸水解酪蛋白、酵母浸出粉、L-胱氨酸、KH₂PO₄、Na₂HPO₄、甘氨酸、L-谷氨酸鈉、NH₄Cl、NaCl于容器中加注射用水溶解，得到A液；

（2）按配制量稱取MgSO₄、MnSO₄.H₂O、葡萄糖加注射用水溶解，得到B液；

（3）將A液跟B液分別滅菌后按比例混合。

6.根據權利要求5所述的培養基的配制方法，其特征在于，步驟（1）中，加注水用水溶解后用8%氫氧化鈉溶液調節PH值至7.2～7.4。

7.根據權利要求5所述的培養基的配制方法，其特征在于，步驟（3）中滅菌溫度為115℃，滅菌時間為30min。

8.一種腦膜炎球菌的培養方法，其特征在于，包括以下步驟，

S1、培養基配制

按設定配方配制權利要求1至6任一項所述的用于腦膜炎球菌的培養基；

S2、固體傳代

用菌種桿刮取腦膜炎球菌固體一代，接種于10%羊血瓊脂培養基平面上涂抹均勻,把已接種好的10%羊血瓊脂培養基放入37℃，7.5% CO₂的培養箱內培養8～20小時；

S3、搖瓶培養

吸取S1中配制的培養基，潤洗10%羊血瓊脂培養基上的菌苔，并接種于S1中配制的培養基， 37℃，100～250rpm培養4～6小時。