[發明專利]用于檢測CYP2C19*2基因多態性的特異性探針及試劑盒有效
| 申請號: | 202110349077.X | 申請日: | 2021-03-31 |
| 公開(公告)號: | CN112921082B | 公開(公告)日: | 2022-02-18 |
| 發明(設計)人: | 李麗瓊;劉林;侯龍輝;楊琴;張喆 | 申請(專利權)人: | 武漢友芝友醫療科技股份有限公司 |
| 主分類號: | C12Q1/6883 | 分類號: | C12Q1/6883;C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司: | 北京超凡宏宇專利代理事務所(特殊普通合伙) 11463 | 代理人: | 彭月 |
| 地址: | 430000 湖北省武漢市東湖新技術開發區高新二路3*** | 國省代碼: | 湖北;42 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 用于 檢測 cyp2c19 基因 多態性 特異性 探針 試劑盒 | ||
1.一種用于檢測CYP2C19*2基因多態性的特異性探針,其中,CYP2C19*2位點的特異性探針至少包括:CYP2C19*2野生型探針以及CYP2C19*2突變型探針,
其特征在于:
所述CYP2C19*2野生型探針如下式(1)所示:
5'-(R1)-TTTCCCGGGAACCCAT-(Q)-3' (1)
其中,式(1)中R1表示熒光報告基團,Q表示非熒光猝滅基團,SNP位點G位于探針5'端起的第7位堿基上;式(1)中5'端起的第3位堿基是1個LNA修飾。
2.根據權利要求1所述的特異性探針,其特征在于:
所述式(1)中R1為FAM或VIC,Q為MGB。
3.根據權利要求1-2任一項所述的特異性探針,其特征在于:
CYP2C19*2突變型探針為
5'-(R2)-ATTTCCCAGGAACCCAT-(Q)-3' (2)
其中,式(2)中R2為與式(1)中R1不同的熒光報告基團,Q為與式(1)中Q相同的非熒光猝滅基團。
4.一種用于檢測CYP2C19基因多態性的檢測試劑盒,其特征在于:
該試劑盒具有如權利要求1-3任一項所述的CYP2C19*2基因多態性的特異性探針。
5.根據權利要求4所述的檢測試劑盒,其特征在于,所述試劑盒還包括熱穩定性DNA聚合酶。
6.根據權利要求4-5任一項所述的檢測試劑盒,其特征在于:所述檢測試劑盒還包括:CYP2C19*2位點的特異性引物對,以及內標引物對和內標探針,
CYP2C19*2上游引物:5'-CTTAGATATGCAATAATTTTCCCACTATCA-3',
CYP2C19*2下游引物:5'-CCATTTTGATCAGGAAGCAATCA-3',
CYP2C19*2ARMS引物:5'-AGGTTTTTAAGTAATTTGTTATGGGTTCTT-3',
內標正向引物:5'-GGGCCACTAGGCGCTCA-3',
內標反向引物:5'-AGCCACCCGCGAACTCA-3',
內標探針:5'-(ROX)-CTCTCCCTCCGCGCAGCCG-(BHQ2)-3'。
7.根據權利要求4-5任一項所述的檢測試劑盒,其特征在于,所述試劑盒包括:陽性對照液和空白對照液,所述陽性對照液中至少含有CYP2C19*2位點野生型質粒、CYP2C19*2位點突變型質粒,所述空白對照為Tris-HCl緩沖液。
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