[發明專利]高效降解氨基甲酸乙酯的菌株及其應用

有效

• 申請號: 202110342636.4
• 申請日: 2021-03-30
• 公開（公告）號: CN113174342B
• 公開（公告）日: 2023-07-07
• 發明（設計）人: 張素芳;董乃慧;紀超凡;梁會朋;林心萍;薛思宇;熊可欣
• 申請（專利權）人: 大連工業大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12G3/02;C12P1/04;A23L5/20;C12R1/01
• 代理公司: 大連格智知識產權代理有限公司 21238
• 代理人: 劉琦

1.一株高效降解氨基甲酸乙酯的根瘤土壤桿菌，其特征在于，菌株DL-DNH02?保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心CGMCC，保藏編號：CGMCC?No.21309。

2.一種權利要求1所述菌株DL-DNH02在降解氨基甲酸乙酯中的應用。

3.根據權利要求2所述菌株DL-DNH02在降解氨基甲酸乙酯中的應用，其特征在于，所述菌株DL-DNH02在降解氨基甲酸乙酯中的應用還包括在發酵食品中降解氨基甲酸乙酯。

4.根據權利要求3所述菌株DL-DNH02?在降解氨基甲酸乙酯中的應用，其特征在于，所述在發酵食品中降解氨基甲酸乙酯的應用包括在白酒中降解氨基甲酸乙酯；所述在白酒中降解氨基甲酸乙酯的過程包括將所述菌株DL-DNH02接種至白酒中，以30℃、100rpm的條件溫育5天降解白酒中的氨基甲酸乙酯。

5.根據權利要求2所述菌株DL-DNH02在降解氨基甲酸乙酯中的應用，其特征在于，所述菌株DL-DNH02在降解氨基甲酸乙酯中的應用還包括所述菌株DL-DNH02的發酵產物在降解氨基甲酸乙酯中的應用，所述發酵產物包括所述菌株DL-DNH02的含菌發酵液、發酵液上清、菌體懸浮液和細胞裂解液。

6.一種權利要求1所述菌株DL-DNH02用于氨基甲酸乙酯降解劑的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1、將活化后的菌株DL-DNH02培養液以10%接種量接種于營養肉湯培養基進行培養，在30℃、180rpm?恒溫振蕩培養24?h，獲得種子液；

S2、將S1步驟所述種子液按1：10比例接種于裝有發酵培養基的生產發酵罐，通氣量0.6m³/min，攪拌速率180rpm，30℃條件下培養48h；發酵結束后獲得菌體數量≥1.0×10^9?CFU/mL的發酵液；

S3、含菌發酵液微膠囊的制備：收集?S2?步驟所述發酵液，經冷凍真空干燥后，利用去離子水回調體積至原體積的1/20，制得所述DL-DNH02含菌發酵液，經海藻酸鈉包埋后制成所述含菌發酵液微膠囊；

S4、發酵液上清微膠囊的制備：離心?S3?所述?DL-DNH02?含菌發酵液并收集DL-DNH02茵體沉淀物和DL-DNH02發酵液上清；所述DL-DNH02發酵液上清經冷凍真空干燥，利用去離子水回調體積至其原體積的?1/20，得到所述DL-DNH02發酵液上清，經海藻酸鈉包埋后制成所述發酵液上清微膠囊；

S5、菌體懸浮液微膠囊的制備：稀釋S4步驟所述DL-DNH02菌體沉淀物，得到濃度20?OD的所述DL-DNH02菌體懸浮液，經海藻酸鈉包埋后制成所述菌體懸浮液微膠囊；

S6、細胞裂解液微膠囊的制備：取S5步驟所述菌株DL-DNH02菌體懸液經過細胞破壁得到所述DL-DNH02細胞裂解液，經海藻酸鈉包埋后制成所述細胞裂解液微膠囊。