[發明專利]一種視網膜內和/或視網膜下纖維化動物模型的構建方法

有效

• 申請號: 202110342280.4
• 申請日: 2021-03-30
• 公開（公告）號: CN113057142B
• 公開（公告）日: 2022-12-09
• 發明（設計）人: 王鈺嬌;岑小波;殷宏玉;張朝茂;羅巾權
• 申請（專利權）人: 四川大學華西醫院;成都華西海圻醫藥科技有限公司
• 主分類號: A01K67/027
• 分類號: A01K67/027;A61K49/00
• 代理公司: 成都高遠知識產權代理事務所(普通合伙) 51222
• 代理人: 李高峽;張娟

本發明公開了一種視網膜內和/或視網膜下纖維化動物模型的構建方法，它是向非人靈長類動物的眼部給予重組腺病毒AAV?VEGF得到動物模型。本發明選擇非人靈長類恒河猴，通過眼局部給予AAV?VEGF得到的動物模型可以同時模擬nAMD的長期CNV和SRF，并且在短時間內就能得到能夠長期模擬nAMD的晚期表型SRF。

技術領域

本發明具體涉及一種視網膜內和/或視網膜下纖維化動物模型的構建方法。

背景技術

年齡相關性黃斑變性(age-related macular degeneration，AMD)是導致發達地區50歲以上人群不可逆性盲的首要病因。中國由于人口老齡化日趨嚴重，AMD也已成為重要的致盲性眼病。由于發病機制不清，一直是眼科臨床工作的重點及難點。AMD根據臨床病理特征分為干性(萎縮性)和濕性(nAMD)兩類，而SRF(視網膜下纖維化，又稱為黃斑盤狀變性)被認為是濕性AMD的晚期階段，是造成不可逆性視力受損的主要原因及nAMD抗VEGF(抗血管內皮生長因子)治療的重要瓶頸。因此，迫切需要研究SRF發病機制，以期阻止nAMD進展以指導有效治療。

目前已有運用大小鼠，兔，豬和猴等物種建立了能夠模擬AMD部分重要的病理特征，但是仍未有任何動物模型可以重現人nAMD的所有表型。Ambati等于2003年報道了兼具類似干性AMD及濕性AMD(CNV)病理改變的基因敲除動物模型，即Ccl-2-/-和Ccr-2-/-小鼠模型，然而作為一種免疫缺陷動物，此類小鼠的存活率以及成模率不甚理想。也有多項研究利用激光誘導CNV嚙齒動物模型來研究AMD晚期SRF的發病機制，但是首先，激光誘導的CNV持續時間較短(不超過1個月)并能自行恢復，不足與進行長期的藥效學觀察尤其是進行SRF的觀察及研究；其次，不是所有激光誘導的CNV病灶都能夠出現SRF；再者，解剖結構和人類相比，嚙齒動物由于壽命短及眼球解剖差異大(眼球小，無黃斑區)等缺點，也不能真實反應AMD病人CNV和SRF特點。

由于nAMD病因復雜、病程長及臨床病變多樣，目前還沒有任何動物模型可以重現人nAMD所有表型，尤其是早期和晚期nAMD病變都能夠模擬的體內動物模型，并且纖維化的動物模型耗時均較長，這些都給建立該疾病動物模型帶來了挑戰。

發明內容

為解決上述問題，本發明提供了一種視網膜內和/或視網膜下纖維化動物模型的構建方法，它是向非人靈長類動物的眼部給予重組腺病毒AAV-VEGF得到動物模型。

進一步地，它是向非人靈長類動物眼部鞏膜位置給予重組腺病毒AAV-VEGF得到動物模型。

進一步地，所述非人靈長類動物為新大陸猴或舊大陸猴，優選舊大陸猴。

更進一步地，所述舊大陸猴為獼猴，所述獼猴為恒河猴、熊猴、短尾猴、臺灣巖猴或平頂猴，優選恒河猴。

進一步地，所述重組腺病毒AAV-VEGF的劑量為1.6*10⁷～1.6*10⁹μg/眼。

本發明還提供了一種視網膜內和/或視網膜下纖維化動物模型，它是眼部被給予重組腺病毒AAV-VEGF的非人靈長類動物。

進一步地，它是眼部鞏膜下的脈絡膜上腔位置被給予重組腺病毒AAV-VEGF的非人靈長類動物。

進一步地，所述非人靈長類動物是舊大陸猴；所述舊大陸猴為獼猴。

進一步地，所述獼猴為恒河猴、熊猴、短尾猴、臺灣巖猴或平頂猴，優選恒河猴。

本發明還提供了一種前述方法構建的動物模型在篩選治療視網膜內和/或視網膜下纖維化的藥物中的應用。

本發明還提供了一種前述方法構建的動物模型在研究視網膜內和/或視網膜下纖維化病理機制中的應用。

本發明最后提供了一種重組腺病毒AAV-VEGF在構建視網膜內和/或視網膜下纖維化動物模型中的應用。