[發明專利]用于光系統II內周天線CP43和CP47的提取制備裝置及方法

有效

• 申請號: 202110340709.6
• 申請日: 2021-03-30
• 公開（公告）號: CN113069790B
• 公開（公告）日: 2022-08-30
• 發明（設計）人: 董芳
• 申請（專利權）人: 臨沂大學
• 主分類號: B01D15/08
• 分類號: B01D15/08;B01D36/00
• 代理公司: 北京棧橋知識產權代理事務所(普通合伙) 11670
• 代理人: 潘衛鋒

1.用于光系統II內周天線CP43和CP47的提取制備裝置，其特征在于，主要包括離心機主體（1）、葉片處理裝置（2）、加液裝置（3）和移液裝置（4）；

所述離心機主體（1）固定在水平臺面上，離心機主體（1）中部設有圓柱空槽型的離心槽（11），所述離心槽（11）內設有離心柱（12），離心機主體（1）底部中心處設有與所述離心柱（12）底端連接的離心電機（13），所述離心柱（12）內部邊緣處十字型設有四個用于放置試管的試管槽（14），離心柱（12）中心處設有用于自動對所述試管槽（14）內試管進行壓蓋密封的自動壓封器（15）；

所述葉片處理裝置（2）包括固定設置在所述離心機主體（1）左側端的固定架（21）、安裝在所述固定架（21）上端的勻漿機（22）、安裝在固定架（21）中部的勻漿容器（23）和安裝在固定架（21）中下部的過濾器（24），

所述勻漿容器（23）包括活動套接在所述固定架（21）上的套桿（231）和活動安裝在所述套桿（231）遠端的勻漿杯（232），所述勻漿杯（232）下端設有出料漏斗（234），所述出料漏斗（234）與勻漿杯（232）連接處設有排液閥（235）；

所述過濾器（24）包括套接在所述固定架（21）上的活動套桿（241）和活動安裝在所述活動套桿（241）遠端的集液杯（242），所述集液杯（242）上端設有多層一次性紗布，所述集液杯（242）側壁下部設有出液閥（245）；

所述加液裝置（3）包括固定設置在所述離心機主體（1）后側端的旋轉架（31）和分別安裝在所述旋轉架（31）兩側的低滲緩沖液罐（32）、增溶液罐（33），所述低滲緩沖液罐（32）側壁下端外側設有加液閥一（321），所述增溶液罐（33）側壁下端外側設有加液閥二（331），所述加液閥一（321）和加液閥二（331）均可旋轉至所述試管槽（14）正上方；

所述移液裝置（4）包括固定設置在所述離心機主體（1）右側端的移液架（41）、固定安裝在所述移液架（41）底部的負壓取液機（42）和安裝在所述移液架（41）頂端的伸縮取液管（43）；

所述伸縮取液管（43）下端活動套接有可更換的一次性取液管（44）；

所述離心柱（12）內還設有負壓發生器（17），所述負壓發生器（17）通過內部管道與四個所述試管封蓋（155）連通，用于使試管內形成負壓環境。

2.根據權利要求1所述的用于光系統II內周天線CP43和CP47的提取制備裝置，其特征在于，所述離心機主體（1）前側端面上設有控制面板（16）。

3.根據權利要求1所述的用于光系統II內周天線CP43和CP47的提取制備裝置，其特征在于，所述試管槽（14）內設有用于固定所述試管的固定夾（141）。

4.根據權利要求1所述的用于光系統II內周天線CP43和CP47的提取制備裝置，其特征在于，所述自動壓封器（15）包括固定設置在離心柱（12）內部的微型液壓泵（151）、連接在所述微型液壓泵（151）上側輸出端的液壓升降桿（152）、安裝在所述液壓升降桿（152 ）頂端的電控旋轉頭（153）、呈十字型固定安裝在所述電控旋轉頭（153）側邊的四個連接桿（154）和分別設置在四個所述連接桿（154）遠端的試管封蓋（155）。

5.根據權利要求1所述的用于光系統II內周天線CP43和CP47的提取制備裝置，其特征在于，所述勻漿杯（232）上端活動設有防濺蓋（233），所述勻漿機（22）底端的機頭可貫穿所述防濺蓋（233）置于所述勻漿杯（232）內部。

6.根據權利要求5所述的用于光系統II內周天線CP43和CP47的提取制備裝置，其特征在于，所述勻漿機（22）底端的機頭可貫穿所述防濺蓋（233）置于所述勻漿杯（232）內部。

7.根據權利要求1所述的用于光系統II內周天線CP43和CP47的提取制備裝置，其特征在于，所述低滲緩沖液罐（32）與所述增溶液罐（33）均為隔溫保存罐。

8.利用權利要求1-7任意一項所述提取制備裝置進行光系統II內周天線CP43和CP47的提取制備方法，其特征在于，主要包括以下步驟：

S1：葉片處理

將葉片剪碎后放入勻漿杯（232）中，并向勻漿杯（232）中加入緩沖液，蓋上防濺蓋（233）后將勻漿容器（23）向上移動，使勻漿機（22）的機頭伸入勻漿杯（232）內，開啟勻漿機（22）對勻漿杯（232）內的葉片進行勻漿處理，處理結束后打開排液閥（235）將勻漿液排至過濾器（24）中，勻漿液經過多層一次性紗布過濾去除殘留葉片后進入集液杯（242）收集；

S2：葉綠體分離

在試管槽（14）內放置試管，將試管轉動至出液閥（245）下方，打開出液閥（245）將過濾后的勻漿液加入至試管中，利用自動封壓器（15）將試管密封后開啟離心電機（13）進行離心，離心結束后用移液裝置（4）將位于試管中部的葉綠體取出；

S3：類囊體膜制備

將一空白試管轉動至移液裝置（4）的伸縮取液管（43）下方，將步驟S2取得的葉綠體轉移時空白試管內，然后將加液裝置（3）的低滲緩沖液罐（32）轉動至試管上方，向試管內加入低滲緩沖液，用自動封壓器（15）將試管密封后開啟負壓發生器（17），使試管內形成負壓條件，加速葉綠體的脹破，然后開啟7離心電機（13）進行離心，離心結束后更換伸縮移液管（43）上套接的一次性取液管（44），然后用移液裝置（4）抽取試管內含有類囊體膜的上清液；

S4：PSII顆粒制備

將一空白試管轉動至移液裝置（4）的伸縮取液管（43）下方，將步驟S3取得的上清液轉移時空白試管內，然后將加液裝置（3）的增溶液罐（33）轉動至試管上方，向試管內加入增溶液，利用自動封壓器（15）將試管密封后開啟離心電機（13）進行離心，離心結束后用移液裝置（4）抽取試管內含有光系統II的上清液；

S5：PSII放氧核心復合物制備

將步驟S4中取得的上清液電泳處理后用離子交換柱洗脫得到PSII放氧核心復合物；

S6：CP43和CP47的提取制備

將步驟S5中制備得到的PSII放氧核心復合物用填充不同緩沖液的離子交換柱分別洗脫，得到CP43和CP47。