[發明專利]桃金娘提取物抗菌劑的制備及其抑菌作用

在審

• 申請號: 202110338549.1
• 申請日: 2021-03-30
• 公開（公告）號: CN112773829A
• 公開（公告）日: 2021-05-11
• 發明（設計）人: 陶正國;趙麗云;林勁冬;潘丹陽;李輝;余勃;其他發明人請求不公開姓名
• 申請（專利權）人: 廣州立達爾生物科技股份有限公司
• 主分類號: A61K36/61
• 分類號: A61K36/61;A61P31/04;A61P31/10;A23K10/30
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本發明提供幾種桃金娘提取物制成的抗菌劑分別來自桃金娘水提取物、乙醇提取物、丙酮提取物、乙酸乙酯提取物、石油醚提取物、甲醇提取物和正己烷提取物，實驗表明它們各自對革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌和真菌的生長具有一定的抑制作用。以桃金娘科桃金娘屬植物桃金娘的葉片為原料，經過適當粉碎后采用不同濃度和比例的溶劑以一定工藝條件提取、加工得到不同的桃金娘提取物制劑。本發明的桃金娘提取物，制備工藝易于實現工業化，所得提取物制劑抗菌效果顯著，具有抑菌廣譜性，可作為替代抗生素廣泛應用于牲畜飼料中，為植物源抗菌劑在飼料工業上的應用提供良好的愿景。

技術領域

本發明屬于天然植物抗菌劑領域，具體涉及桃金娘提取物抗菌劑在抑制金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和白色念球菌生長繁殖的作用。

背景技術

已有研究表明桃金娘科桃金娘屬桃金娘植物的果實和葉子提取物經分離純化可得到上百種化合物，其中具有多種顯著抗菌作用的化合物。對于桃金娘中具體化合物的抗菌效能的研究較多，而對于將其抗菌性能應用到飼料工業中作為天然植物提取物來源的抗菌劑的應用尚未有報道，因此，本發明研制桃金娘提取物抗菌劑，探索了不同提取劑，比較了不同制劑方法對桃金娘抗菌劑的抗菌效果的影響，測定了其對革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌和真菌的影響，初步確定了桃金娘葉片提取物作為飼料工業中替抗產品的潛力，為今后開發植源性抗菌產品提供了理論基礎和實踐方法。

發明內容

本發明解決的技術問題是：針對飼料工業上植源性抗菌劑的缺乏，提供了桃金娘葉提取物抗菌劑的制備及其抑菌效果評價。

上述的抑菌作用實際上是指對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和白色念球菌的抑制。

上述的桃金娘提取物指的是水提取物、乙醇提取物、丙酮提取物、乙酸乙酯提取物、石油醚提取物、甲醇提取物和正己烷提取物。其中乙醇提取物采用的提取劑是濃度為20%-100%的乙醇水溶液。

上述的抗菌劑劑型為顆粒劑和粉劑，桃金娘提取物通過真空干燥或噴霧干燥得到顆粒或粉末狀產品。

本發明的乙醇提取物抗菌劑對于金黃色葡萄球菌具有顯著的抑制效果，對于大腸桿菌和白色念球菌也有較強的抑制作用。

本發明的丙酮提取物抗菌劑和乙酸乙酯提取物抗菌劑對于金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和白色念球菌都具有較強的抑制作用。

本發明中提供的桃金娘水提取物、乙醇提取物、丙酮提取物、乙酸乙酯提取物、石油醚提取物、甲醇提取物、正己烷提取物對金黃色葡萄球菌的最低抑菌濃度分別是1.25mg/ml，0.6mg/ml，2.5mg/ml，5.0mg/ml，2.5mg/ml，0.6mg/ml，1.25mg/ml。

本發明中提供的桃金娘水提取物、乙醇提取物、丙酮提取物、乙酸乙酯提取物、石油醚提取物、甲醇提取物、正己烷提取物對大腸桿菌的最低抑菌濃度分別是5.0mg/ml，2.6mg/ml，5.0mg/ml，20.0mg/ml，5.0mg/ml，5.0mg/ml，7.5mg/ml。

本發明中提供的桃金娘水提取物、乙醇提取物、丙酮提取物、乙酸乙酯提取物、石油醚提取物、甲醇提取物、正己烷提取物對白色念球菌的最低抑菌濃度分別是5.0mg/ml，10.0mg/ml，5.0mg/ml，5.0mg/ml，5.0mg/ml，5.0mg/ml，5.0mg/ml。

具體實施方式

供試植物和菌株

桃金娘科桃金娘屬的桃金娘葉來自廣東揭陽市，金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和白色念球菌由中國科學院華南植物園天然產物化學和生物學組提供。

三種供試菌液的制備: 取金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和白色念球菌培養在37 ℃恒溫培養箱中12h，用培養基稀釋，通過測定OD₆₀₀為0.070左右，得到1.25×10⁶CFU/mL的供試菌液。

連續二倍稀釋法: