[發明專利]一種高安全性的非滅活型病毒保存液及制備方法

有效

• 申請號: 202110336321.9
• 申請日: 2021-03-29
• 公開（公告）號: CN113046412B
• 公開（公告）日: 2021-12-14
• 發明（設計）人: 董占龍;龍波;翟贏;梁欣裕;覃玲
• 申請（專利權）人: 深圳市麥瑞科林科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/24
• 分類號: C12Q1/24
• 代理公司: 深圳中圳知識產權代理事務所(普通合伙) 44768
• 代理人: 李健威

1.一種高安全性的非滅活型病毒保存液，其特征在于，包括hanks基礎液、抗生素藥劑、蛋白保護劑、冷凍保護劑和營養劑，所述蛋白保護劑包括牛血清白蛋白、甘露醇、甘油、丁二醇、氯化鈉以及苯甲酸鈉，所述冷凍保護劑包括海藻酸鈉、聚乙二醇、葡萄糖，所述營養劑包括天冬酰胺、谷氨酰胺、蘇氨酸、天冬氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸，所述抗生素藥劑包括慶大霉素、安氯西林鈉和丁胺卡那霉素；

所述非滅活病毒保存液中各物質的重量配比為：hanks基礎液100份、抗生素藥劑4份、蛋白保護劑3份、冷凍保護劑1份和營養劑1份；

所述蛋白保護劑中各物質的重量配比為：牛血清白蛋白10份、甘露醇8份、甘油2份、丁二醇6份、氯化鈉3份、苯甲酸鈉3份以及水100份；

所述冷凍保護劑中各物質的重量配比為：海藻酸鈉15份、聚乙二醇9份、葡萄糖9份以及水100份；

所述營養劑中各物質的重量配比為：天冬酰胺3份、谷氨酰胺3份、蘇氨酸3份、天冬氨酸2份、纈氨酸2份、亮氨酸2份、異亮氨酸1份以及水100份；

所述抗生素藥劑中各物質的重量配比為：慶大霉素5份、安氯西林鈉2份、丁胺卡那霉素4份以及水50份；

用于配制上述病毒保存液的裝置包括配置筒、高壓滅菌筒、冷卻裝置和保存筒；所述配置筒置于一振動器中，所述振動器包括前后兩塊立板，所述立板之間設有一圓柱面板，所述立板與所述圓柱面板之間通過彈簧連接，所述圓柱面板內側設有一圈海綿墊，所述圓柱面板的內徑略大于所述配置筒的外徑，當所述配置筒置于所述振動器中時會擠壓所述海綿墊，所述海綿墊起到緩沖以及夾持的作用，所述圓柱面板的底部設有夾件用于夾持所述配置筒的底部防止所述配置筒在所述圓柱面板內上下滑動，所述圓柱面板與其中一塊立板之間設有一塊推板，所述推板為圓弧形并與所述圓柱面板吻合，所述推板面對所述圓柱面板的一側設有緩沖墊，所述推板另一側與連桿連接，所述連桿的另一端與凸輪連接，所述凸輪與電機的輸出軸連接，所述連桿與所述凸輪接觸的一端為圓球形以減小連桿與凸輪之間的摩擦力，所述連桿穿過立板并在立板上設有限位塊用來固定連桿的方向，電機工作時，所述連桿在所述凸輪的作用下來回運動，所述配置筒在所述推板的推力作用下與所述圓柱面板一起朝一個方向運動，隨后又在彈簧的彈力作用下朝反方向運動，不斷重復實現振蕩效果，使配置筒內的溶液更快地均勻混合，所述配置筒的底部設有可開閉的開口，所述開口通過軟管與所述高壓滅菌倉連通；所述高壓滅菌筒包括滅菌倉，所述滅菌倉上方設有一輸液管和安全泄壓閥，所述滅菌倉下方設有出液管，所述輸液管與所述配置筒相連，所述出液管與所述保存筒相連，所述輸液管和所述出液管上設有密閉性良好的的開關，當所述出液管、出液管和所述安全泄壓閥均處于關閉狀態時，所述滅菌倉為一封閉空間，所述滅菌倉外壁上還設有電加熱管路，所述電加熱管路與PLC控制器連接，所述PLC控制器用于控制所述電加熱管路的加熱功率，所述滅菌倉內壁上還裝有溫度感應器和氣壓感應器，所述溫度感應器和所述氣壓感應器通過設置在所述滅菌倉壁上的線路與所述PLC控制器相連，所述PLC控制器將實時接收所述溫度感應器和所述氣壓感應器上報的溫度和氣壓信息，并根據所述溫度和氣壓信息控制所述安全泄壓閥的打開狀態，使所述滅菌倉內保持預設的溫度和氣壓進行滅菌，所述滅菌倉外側設有安全罩，所述安全罩上設有控制面板，所述控制面板與所述PLC控制器連通，通過所述控制面板能夠對滅菌的溫度、氣壓以及時間進行設定，所述安全罩內設有隔熱防護層，所述隔熱防護層內設有隔熱防護墊，所述隔熱防護層將隔絕熱量從所述滅菌倉內傳遞到安全罩外，既保證了安全性，又確保了能源的利用率，為所述電加熱管路提供電能的電源組件安裝在所述滅菌倉與所述安全罩之間，所述PLC控制器還設有自我保護機制，當所述溫度感應器檢測的溫度或是所述氣壓感應器檢測的氣壓超過閾值時，將自動切斷電源，所述滅菌倉與所述安全罩之間還設有冷凝管，在高壓高溫滅菌完成后，將啟動所述冷凝管對滅菌倉作初步的降溫處理；所述冷卻裝置為杯體，所述保存筒置于所述杯體中，所述杯體的杯壁包括內外兩層，內層杯壁中設有螺旋管道，所述螺旋管道內裝有冷卻劑，外層杯壁上設有一條豎直管道，所述豎直管道上方與所述螺旋管道上方連通，所述豎直管道上裝有微型液泵，所述杯體底部設有換熱裝置，所述豎直管道下方與所述螺旋管道下方通過所述換熱裝置連通形成閉環，所述冷卻劑在所述螺旋管道中緩慢下降，吸收所述保存筒中大量的熱量，經由所述換熱裝置釋放大量熱量后，在微型液泵的作用下通過所述豎直管道上升至所述螺旋管道上方，不斷重復達到降低所述保存管中液體溫度的作用，所述換熱裝置包括蛇形管道，所述蛇形管道的兩端分別與所述豎直管道和所述螺旋管道連通，所述蛇形管道置于換熱池中，所述換熱池上方設有蒸汽回收腔，所述蒸汽回收腔內裝有壓縮機構，所述蒸汽回收腔的外部裝有散熱片，所述散熱片通過熱導棒與所述蒸汽回收腔內部連通，當所述換熱池中的液體吸熱蒸發至所述蒸發回收腔，并在所述壓縮機構的壓縮作用下重新變回液態，在壓縮過程中釋放的熱量通過導熱棒傳遞到所述散熱片并擴散到空氣中，所述蒸汽回收腔上設有腔門，在壓縮過程中腔門處于關閉狀態，所述腔門上設有若干個可開閉的小孔，當壓縮完成后小孔打開，壓縮形成的液體通過小孔下落至換熱池中；

用于配制上述病毒保存液的裝置還包括一種存儲所述病毒保存液的試管，包括試管體、密封帽和儲油包，所述密封帽設有內螺紋，所述試管體上端設有外螺紋，所述密封帽螺接在所述試管體上端，所述儲油包設置在所述試管體內壁上，所述密封帽擰緊時，能防止試管內液體泄露，所述密封帽內設有內攪拌棒和固定套，所述固定套的豎直部固定在所述密封帽上，所述密封帽的頂端設有方便擠壓所述攪拌棒下壓的開口，所述開口的直徑大于所述攪拌棒的直徑，小于所述固定套的直徑，所述攪拌棒的上端內壁上設有下壓擋片，所述攪拌棒的上端一側設有尖刺體，當所述密封帽擰緊時，所述尖刺體會與所述儲油包的上方，下壓所述攪拌棒后，所述尖刺體會刺破所述儲油包，所述儲油包中的油性液體會覆蓋在病毒保存液的上方，防止病毒外泄。

2.制備如權利要求1所述的一種高安全性的非滅活型病毒保存液的方法，包括以下步驟：制備抗生素藥劑：按所述抗生素藥劑中各物質的比例量取慶大霉素、安氯西林鈉和丁胺卡那霉素并溶于水中，攪拌均勻后進行120℃高壓滅菌15分鐘，然后冷卻至10℃保存備用；制備蛋白保護劑：按所述蛋白保護劑中的所述各物質的重量比例量取牛血清白蛋白、甘露醇、甘油、丁二醇、氯化鈉和苯甲酸鈉并溶于水中，攪拌均勻后進行120℃高壓滅菌15分鐘，然后冷卻至10℃保存備用；制備冷凍保護劑：按所述冷凍保護劑中所述各物質的重量配比的比例量取海藻酸鈉、聚乙二醇和葡萄糖并溶于水中，攪拌均勻后進行120℃高壓滅菌15分鐘，然后冷卻至10℃保存備用；制備營養劑：按所述營養劑中的所述各物質的重量配比比例量取天冬酰胺、谷氨酰胺、蘇氨酸、天冬氨酸、纈氨酸、亮氨酸和異亮氨酸并溶于水中，攪拌均勻后進行120℃高壓滅菌15分鐘，然后冷卻至10℃保存備用；將上述制備的抗生素藥劑、蛋白保護劑、冷凍保護劑和營養劑分別取對應的分量加入到所述hanks基礎液中，攪拌均勻后將混合溶液的PH值調整至4.5~5.2，進行封裝并保存在-10℃的環境中。