[發明專利]基于胞苷脫氨酶LjCDA1L1_4a及其突變體的單堿基突變系統

有效

• 申請號: 202110333256.4
• 申請日: 2021-03-29
• 公開（公告）號: CN113073094B
• 公開（公告）日: 2023-03-28
• 發明（設計）人: 元少春;徐安龍;陳燕;羅靈杰;陳尚武;鄧麗思
• 申請（專利權）人: 中山大學
• 主分類號: C12N9/78
• 分類號: C12N9/78;C12N15/55;C12N15/85
• 代理公司: 廣州三環專利商標代理有限公司 44202
• 代理人: 顏希文;楊虹坤

1.一種胞苷脫氨酶LjCDA1L1_4a的突變體，其特征在于，所述突變體為LjCDA1L1_4a-D125E或LjCDA1L1_4a-D125G；所述突變體LjCDA1L1_4a-D125E的氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示，所述突變體LjCDA1L1_4a-D125G的氨基酸序列如SEQ ID NO:6所示。

2.如權利要求1所述的突變體，其特征在于，編碼所述胞苷脫氨酶突變體LjCDA1L1_4a-D125E的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示；編碼所述胞苷脫氨酶突變體LjCDA1L1_4a-D125G的核苷酸序列如SEQ ID NO:5所示。

3.一種單堿基編輯器BE，其特征在于，所述編輯器包括A質粒和B質粒，所述A質粒為以下質粒中的任一種：

（1）NLS-LjCDA1L1_4a D125E -linker-nCas9-NLS-UGI-T2A-EGFP或

（2）NLS-LjCDA1L1_4a D125G -linker-nCas9-NLS-UGI-T2A-EGFP；

B質粒為：U6-SgRNA-CAG-UGI-T2A-mcherry；

所述NLS-LjCDA1L1_4a D125E編碼的氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示；

所述NLS-LjCDA1L1_4a D125G編碼的氨基酸序列如SEQ ID NO:6所示。

4.如權利要求1所述的胞苷脫氨酶LjCDA1L1_4a的突變體在單堿基編輯器中的應用。

5.如權利要求4所述的應用，其特征在于，所述胞苷脫氨酶LjCDA1L1_4a的突變體為LjCDA1L1_4a-D125E或LjCDA1L1_4a-D125G。

6.如權利要求3所述的所述單堿基編輯器BE在單堿基編輯中的應用。

7.如權利要求6所述的應用，其特征在于，所述單堿基編輯為在GC二核苷酸中胞苷編輯中的應用。