[發明專利]一種利用氨基型樹脂分離純化甘油葡萄糖苷的方法

有效

• 申請號: 202110324093.3
• 申請日: 2021-03-26
• 公開（公告）號: CN113061152B
• 公開（公告）日: 2023-02-21
• 發明（設計）人: 陳小龍;陸躍樂;朱林江;張嘉恒;賀朦迪;劉易穎;陳永富
• 申請（專利權）人: 云南萱嘉生物技術有限公司;浙江工業大學
• 主分類號: C07H1/06
• 分類號: C07H1/06;C07H15/04
• 代理公司: 北京挺立專利事務所(普通合伙) 11265
• 代理人: 余瑩

本發明公開了一種利用氨基型樹脂分離純化甘油葡萄糖苷(GG)的方法，該方法首先將陰離子交換樹脂轉型成為帶?NH₂的氨基型樹脂，填充至含有保溫夾套的層析柱中；然后將含有葡萄糖和果糖的甘油葡萄糖苷混合溶液稀釋3倍，其中，稀釋前混合溶液中甘油葡萄糖苷的濃度為400～600g/L，葡萄糖和果糖的濃度均為80～150g/L，再用移液管移取0.1～0.5mL稀釋后的混合溶液并均勻地滴加到樹脂上，采用洗脫劑以0.1～0.5BV/h的流速對樹脂進行洗脫，收集洗脫液，即得純化后的甘油葡萄糖苷溶液。本發明方法可以分離由酶合成GG產生的糖類物質，得到高純度的GG溶液，彌補了分離純化GG領域的技術空白。

技術領域

本發明涉及一種利用氨基型樹脂分離純化甘油葡萄糖苷的方法，屬于分離技術領域。

背景技術

甘油葡萄糖糖苷(Glucosylglycerol，GG)是一種多功能細胞激活劑，由葡萄糖和甘油通過糖苷鍵連接而成。通過不同的連接形式，GG有六種結構，直至目前，β型GG只在高等植物中被檢測到，α型的GG研究的較多，用途也較廣。

2-αGG作為一種多功能細胞激活劑，具有保濕、抗氧化和抗衰老等功效，可用于化妝品行業；作為一種無致齲性的甜味劑，可添加到食品中；同時它還具有治療過敏性呼吸系統疾病、降低血糖等功效，可應用于人體保健品；還能作為一種酶穩定劑，因此具有重大的研究意義和應用價值。

為了滿足工業生產GG的需要，通常采用酶法來合成GG，但由酶合成GG 過程中會產生若干糖類物質，從而影響產品GG的純度。而在已有的文獻記載中，只有活性炭被報導有較好的分離效果(Goedl C,Sawangwan T,Mueller M,et al.A high-yielding biocatalyticprocess for the production of 2-O-(α-d-glucopyranosyl)-sn-glycerol,a naturalosmolyte and useful moisturizing ingredient[J].Angewandte Chemie.2008,47(52):10086-10089.)。因此，迫切需要開發一種高效的分離技術來提高GG的純度，得到高純度的GG溶液。其中，葡萄糖是該產品中的一種主要雜質，但至目前為止尚無較好的去除方法。

發明內容

針對現有技術中的問題，本發明提供一種利用氨基型樹脂分離純化甘油葡萄糖苷的方法，采用該方法可以分離由酶合成GG產生的糖類物質，得到高純度的 GG溶液，彌補了分離純化GG領域的技術空白。

為實現以上技術目的，本發明的技術方案是：

一種利用氨基型樹脂分離純化甘油葡萄糖苷的方法，步驟如下：

(1)將樹脂填充至含有保溫夾套的層析柱中，層析柱體積為150～250 mL/BV，保溫夾套的溫度設置為30～50℃；

(2)將含有葡萄糖和果糖的甘油葡萄糖苷混合溶液稀釋3倍，其中，稀釋前混合溶液中甘油葡萄糖苷的濃度為400～600g/L，葡萄糖和果糖的濃度均為 80～150g/L，然后用移液管移取0.1～0.5mL稀釋后的混合溶液，均勻地滴加到樹脂上，采用洗脫劑以0.1～0.5BV/h的流速對樹脂進行洗脫，收集洗脫液，用液相監控，得到純化后的甘油葡萄糖苷溶液。

優選地，所述的保溫夾套的溫度為40℃。

優選地，所述氨基樹脂是采用樹脂LX-950轉型制備得到，所述轉型制備步驟為：首先采用4％氫氧化鈉和4％鹽酸對樹脂進行交替洗脫，其次用4％賴氨酸轉型，并用液相監控，當樹脂吸附賴氨酸飽和后，再用純水洗至中性，得到氨基型樹脂。

優選地，所述洗脫劑為水或有機溶劑。

進一步優選地，所述有機溶劑為80％體積分數的乙腈水溶液。

優選地，所述的層析柱體積為200mL/BV。